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作者：杨超月

一、常用的细胞培养基介绍

1. BME培养基，基础 Eagle 培养基（basal medium eagle)

BME培养基是一种广泛使用的合成基础培养基，可支持很多种类的哺乳动物细胞生长。BME 最初由 Harry Eagle 针对 HeLa 细胞和小鼠成纤维细胞开发，其发现了体外细胞生长的zui 低要求。BME 不含蛋白、脂类或生长因子。因此，BME 需要添加剂。

2. MEM培养基（Minimum Eagle's Medium）

MEM培养基是所有培养基中zui常用的一种，可用于多种悬浮和贴壁生长的哺乳动物细胞，包括 HeLa、BHK-21、293、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纤维细胞和原代大鼠星形胶质细胞。

3. DMEM培养基，Dulbecco 改良 Eagle 培养基（Dulbecco's Modified Eagle Medium）

DMEM培养基是一种广泛使用的基础培养基，可用于支持很多种类的哺乳动物细胞生长。已经在 DMEM 中培养成功的细胞包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞，以及 HeLa、293、Cos-7 和 PC-12 等细胞系。

4. IMDM培养基（Iscove's Modified Dulbecco's Medium）

IMDM培养基是一种高度富集的合成培养基，非常适用于快速增殖的高密度细胞培养，包括 Jurkat、COS-7 和巨噬细胞。

5. RPMI-1640培养基（Roswell Park Memorial Institute 1640）

RPMI-1640 培养基被发现适用于多种哺乳动物细胞，包括 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、 MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和癌细胞。RPMI 1640 培养基相比其他培养基之所以具有独特的效果，是因为其中含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。RPMI 1640 培养基含有生物素、维生素 B12 以及 PABA，这些成分是 Eagle’s MEM 和DMEM所不具备的。

6. M199培养基（Medium 199）

199 培养基最初配方用于鸡胚成纤维细胞的营养研究。199 培养基由 Earle’s 平衡盐或 Hanks’ 平衡盐配制而成。由 Earle’s 平衡盐配制而成的培养基使用碳酸氢盐/碳酸系统缓冲液，并在 CO2培养箱中保持 pH 值。在大气条件下使用 Earle’s 平衡盐会导致培养基 pH 值迅速升高。由 Hanks’ 平衡盐配制而成的 199 培养基使用专为大气平衡设计的专用盐溶液进行缓冲，在CO2 培养箱中使用会令培养基 pH 值迅速下降。

7. McCoy's 5A（改良）培养基（McCoy's 5A (Modified) Medium）

McCoy's 5 A （改良）培养基是一种通用培养基，可支持多种类型原代细胞、成熟细胞系以及活检组织块的增殖。这种培养基可支持源自正常骨髓、皮肤、脾脏、肾脏、肺、大鼠胚胎及其他组织的原代哺乳动物细胞的生长。Thomas McCoy 博士起初将 McCoy's5 A 培养基配制为基础培养基 5 A 的改良版本。与其他培养基不同，McCoy's5 A 包含还原剂谷胱甘肽、细菌蛋白胨和高浓度葡萄糖。McCoy's 5A（改良）培养基使用碳酸氢钠缓冲体系 (2.2 g/L)，因此需要 5–10% CO2 的环境来维持生理 pH 值。

8. Ham's F-12营养培养基

Ham's F-12 营养混合物 (F-12) 起初设计用于中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的无血清单细胞铺板。自此之后，F-12 已用于 CHO 培养物的无血清生长以及其他哺乳动物细胞的添加血清生长，包括软骨细胞和大鼠前列腺上皮细胞。与其他基础培养基相比，F-12 含有更广泛的成分，包括锌、腐胺、Hypoxanthine和胸苷。CHO 细胞在 F-12 中的无血清生长催生了各种改良配方。

9. Leibovitz L15培养基

Leibovitz L-15 培养基支持 HEP-2 猴肾脏细胞以及胚胎和成人组织的原代组织块生长。L-15 采用磷酸盐和游离氨基酸而非碳酸氢钠进行缓冲。这种培养基适用于支持非 CO2 平衡环境中的细胞生长。L-15 不含蛋白、脂质或生长因子。

10. Neurobasal培养基

Neurobasal 培养基是一种基础培养基，设计用于纯产前和胚胎神经元细胞群的长期维持和成熟，在与 Gibco B-27 补充剂配合使用时无需星形胶质细胞滋养层。Neurobasal 培养基适用于大多数神经元细胞应用。

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二、常用的细胞培养基配套试剂(缓冲液、平衡盐溶液等)

1、无钙、镁、离子溶液(1000ml)

氯化钠(NaCl)8g磷酸二氢钠、(NaH2PO4H20)0.05g、Potassium chloride (KCl)0.2g、碳酸氢钠(NaHCO3)1g、柠檬酸三钠(Na3C6H5O7,H20)1g、葡萄糖1g、加去离子水或双蒸水至1000mL

2、PBS(Phosphate-Buffered saline)磷酸盐缓冲液

甲液:0.2mol/L磷酸氢二钠溶液、磷酸氢二钠(无水)28.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL

乙液:0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、磷酸二氢钠(无水)2.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL

甲、乙液于4℃保存，使用时按表3-2所示比例，配制成所需pH浓度，高压灭菌后室温保存。

3、Hanks液(HBSSHank's Balanced salt solution)

⑴母液甲(20x)配法

①NaCl(A.R)160g、KCl(A.R)8g、MgSO4.7H2O(A.R)2g、MgCl.6H2O(A.R)2g依次溶于800mL双蒸水中，前一物质溶后再加后一种。

②CaCl2(A.R)2.8g溶于100mL双蒸水中，溶时不断搅拌(此液应单配，单溶)。

待上述两溶液中的"溶质"全溶后，将它们混合，再用双蒸水补至1000mL，向其中加2mL氯仿作为防腐剂，置4℃保存。

⑵母液乙(20×)配法

①Na2HPO4.12H2O(A.R)3.04g、KH2PO4(A.R)1.20g、葡萄糖(A.R)20.0g溶于800ml双蒸水中。

②0.4%酚红液0.4g酚红放在玻璃研钵后加0.01N、NaOH11.28mL，直到全部溶解，移入100mL容量瓶中，加水至100mL，过滤，pH为7.4，4℃保存。

待上述各"溶质"完全溶解后，用双蒸水补至1000mL,其中加氯仿2mL作防腐剂，置40℃保存。

3)使用液(1×)配法

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