K1(中国仓鼠卵巢细胞系)

作者：杨超月

一、细胞基本属性
细胞名称 CHO-K1中国仓鼠卵巢细胞
细胞别称 CHO K1; CHOK1; CHO cell clone K1; GM15452
种属来源仓鼠
组织来源卵巢
生长特性贴壁生长
细胞形态上皮细胞样
性别雌
细胞代数 10代以内
倍增时间 ~24 hours
背景介绍 CHO-K1细胞是源自成年中国仓鼠卵巢深入活体组织切片的CHO细胞的亚克隆；CHO-K1细胞的生长需要脯氨酸。
生物安全等级 1
细胞规格 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测无
保藏机构 ATCC; CCL-61 ATCC; CRL-9618 BCRC; 60006 BCRJ; 0069 DSMZ; ACC-110 ECACC; 85051005
培养基 90%F12K+10%FBS
培养条件气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件无血清冻存液，液氮储存
细胞货期现货，1周左右
运输方式复苏发货（T25瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用）顺丰快递
供应限制仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明 以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
收货方式 T25瓶 冻存管
收货处理观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养第三天换液并检查细胞密度
传代比例 首次传代建议1：2传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀，将细胞分离成单个后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。
注意事项

1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。

1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存；
2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
到货须知