重组质粒转染293细胞及表达

作者：杨超月

全文: (0 KB) (1 KB)
输出: BibTeX | EndNote (RIS)

摘要目的:探究通过脂质体转染技术介导重组质粒pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP转染293细胞的方法.方法:采用Lipofectamine 2000方法将包含目的基因pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP的质粒转染293细胞.在转染24 h后于荧光显微镜下观察红色荧光出现情况.收集并浓缩稳定转染后293细胞的上清液,提取细胞膜蛋白和胞浆蛋白,采用Western b1ot方式判断转染细胞是否表达目的蛋白.结果:①荧光显微镜下可观察到红色荧光蛋白(RFP)发出红色荧光.②Western b1ot鉴定结果:提取稳定转染的293细胞胞浆蛋白Western b1ot鉴定可见到大小为62 kD左右的条带.浓缩的上清蛋白与提取的胞膜蛋白Western b1ot鉴定未见到目的蛋白表达.结论:应用脂质体转染技术,成功介导目的基因pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP转染到293细胞中,为进一步研究重组CD13单链抗体对血液肿瘤的靶向杀伤作用打下了实验基础。服务

E-mail Alert
RSS

链接本文:
     或