此外,也可通过磷屏系统扫描得到膜上的图像



5.将膜转移至另一含有100~ 200mL预热至68C、含0.1%SDS的0.5X SSC的塑料盒中,68"C下温和振荡10min.

6.重复步骤5,再洗涤至少2次,在68C下共洗涤3次。

7.在吸水纸上晾干膜,然后让膜于-70C下在含增感屏的暗盒内对X射线片( KodakXAR-5或相应的胶片)放射自显影24~48h (请参阅附录3)。基于钨酸盐的增感屏比以前的稀土增感屏更有效。

此外,也可通过磷屏系统扫描得到膜上的图像。去除Northern印迹.上的放射性(可选)要从固定有RNA的尼龙膜上洗去放射性标记的探针,可将膜在如下的任一体系中温育1~2h;预热到70~75'C的大体积含10 mmolL Tris-Cl (pH7.4)、 0.2% SDS的洗液;预热到68C含50%去离子甲酰胺、0.1 X SSC、0.1%SDS 的洗液。

1.切一张合适大小的带正电荷尼龙膜。用铅笔或圆珠笔标上表示方向的记号。将膜用水润湿,在20XSSC中室温泡lh.

2.在膜浸泡期间,先用0.1mol/L NaOH小心清洗印迹装置,再用无菌水洗干净。

3.把两片厚滤纸用20XSSC浸湿,再放到真空器顶部。

4.把样品槽插入装置的上部,把湿尼龙膜放在样品槽加样孔的底部,用吸管在膜的表面滚动以去除膜与装置夹层中的气泡。

6.加入10X SSC充满所有狭线/斑点,缓慢抽吸至液体穿过尼龙膜,关掉真空,再用10XSSC充满。RNA样品准备

7.把每个RNA样品(溶解在10μL水)分别与30μL RNA变性液混合。




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