南京德尔塔：聚合酶链式反应(PCR)技术
【产品介绍】：
原理 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction PCR)是一种体外扩增特异性DN段的技术。它可以在体外特异地对目的基因进行大量扩增，其巧妙之处在预先设计合成二段分别与待测目的基因二端互补的引物，以起到指向定点的作用；再借助于DNA聚合酶催化的若干次扩增反应后，即可使特定的基因片段成百万倍的扩增。扩增反应分三步： ①变性：当通过加热使DNA双螺旋的氢键断裂，双链解离形成单链DNA。 ②褪火：当温度突然降低时由于模板分子结构较引物要复杂得多，而且反应体系中引物DNA量大大多于模板DNA，使引物和其互补的模板在局部形成杂交链，而模板DNA双链之间互补的机会较少。 ③延伸：在DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷三磷酸底物，以及Mg2+存在的条件下， 以引物为起始点，从5′→3′催化的DNA链延伸反应。 以上3步为一个循环，每一循环的产物可以作为下一循环的模板，若干次循环之后，介于两个引物之间的特异性DN段就得到了大量的复制，数量可达2×107～8拷贝，PCR的实验操作包括模板DNA(或RNA)的制备、引物的设计合成、酶促聚合反应、反应产物的检测等。 操作步骤 (一)模板DNA(靶序列)的制备 进行PCR扩增反应的模板可以是人体组织细胞的染色体DNA，微生物的DNA，或是由mRNA反转录而成的cDNA等。本实验用小鼠肝脏制备染色体DNA作为PCR扩增的模板。 1. 取肝组织0.5g加入2ml裂解液。 2. 冰浴匀浆。 3. 取匀浆液200μl加入裂解液200μl。 4. 加入蛋白酶k至终末浓度为100μg/ml。 5. 以上溶液在65℃保温数小时或过夜，不时震摇。 6. 加入75μl 8M KAC，混匀。 7. 在4℃放置15分钟。 8. 加入750μl氯仿。 9. 经充分震摇后5 000rpm、离心5分钟，将上清液转入一新的Eppenderf管，沉淀弃去。 10. 加入750μl无水乙醇，充分混匀，-20℃静置30分钟。 11. 12 000rpm、离心10分钟，弃去上清，沉淀用500μl 70%乙醇洗一次，10 000rpm、再离心5分钟，弃去上清，于室温将有DNA沉淀的Eppendorf管敞开15～30分钟，使痕量乙醇挥发。 12. 将DNA沉淀团块溶于100μl TE缓冲液，加RNA酶1μl，在37℃水浴放置30分钟。 13. 用等体积的酚/氯仿抽提一次。 14. 取上清，加入1/10体积的NaAc(pH4.8)和2倍体积的无水乙醇，混匀。 15. 12 000rpm、离心10分钟，弃去上清，沉淀用500μl 70%乙醇洗一次，10 000rpm，再离心5分钟，弃去上清，于室温将有DNA沉淀的Eppendorf管敞开15～30分钟，使痕量乙醇挥发。溶于50μl TE。 16. 取1μl样品用500μl双蒸水稀释，在260nm和280nm处测定吸光度。鉴定样品纯度并计算其含量。 17. 将DNA溶液保存于-20℃备用。 试剂盒，进口elisa试剂盒，elisa kit，进口血清，进口试剂，明胶酶谱法检测试剂盒，大鼠elisa检测试剂盒，人elisa检测试剂盒-南京德尔塔技术有限公司 原创作者：德尔塔
【产品名称】：南京德尔塔：聚合酶链式反应(PCR)技术
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【公司简介】：
德尔塔(Delta) 是西安齐岳巴西vs瑞士让球 有限公司旗下品牌，德尔塔(Delta) 目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等，这些产品在国内给数百家高校实验室和数十家中科研研究所及药厂长期供应，德尔塔(Delta) 成立之初以代理国外进口品牌的为主，产品主要涉及磷脂、PEG衍生物等产品，随着公司的发展和扩大，公司更注重自主品牌的建立和高附加值的高端产品研发并且注册了自己品牌商标，在未来3-5年公司预计将建立一个综合型的大型实验室，该实验室不仅提供全方面的纳米靶向药物科研产品及定制外包服务，还将承接其他研究领域的科研产品和定制外包服务，预计该实验室还将与国内数十家大型药厂进行前期药物研发的科研合作，为药厂提供科研产品及技术服务，在研发阶段协助药厂开发抗肿瘤新药，一旦新药开发成功，在研发阶段积累的高端辅料产品和研发经验将支持我们建立一条药用辅料生产线给该肿瘤新药长期提供高端药用辅料。在高校和研究所科研领域上面公司不但要抢占国内市场还要开拓国际市场，国际业务以在2018年初开始启动，部分产品已远销欧美大陆，计划在未来3年-5年公司的拳头产品要抢占大量的国际市场，使得德尔塔(Delta) 品牌发展成一个国际品牌。
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