抗体保存注意事项



抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。以abcam 抗体保存方法为主,同样也可以应用到其他绝大部分的抗体产品!

1. 收到抗体后请务必在12000rpm 离心1-5min后再打开管盖进行分装和保存!质优的抗体使用非常特殊的储存管,只有在12000rpm 离心1-5min 才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来。即使是在10000rpm 离心也会导致离心不完全,导致出现抗体的量不足的现象!

2. 对于大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在-20 or -80 度对绝大多数抗体来说,保存在-20 度是完全足够了。没有任何证据显示保存在-80度会有更多的好处!注意:也有注明要4度保存的,千万就不要冻存了!

(1) 分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。

(2) 分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于10ul每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响

(3) 复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在4 度,避免再冻起来!

(4) 抗体工作液应该当天配制当天用完,在4 尽量不要超过1 天。

(5) 绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。尽量将抗体保存在冰箱里层,而不是门上。

抗体保存注意事项

3. 大部分抗体收到后4 度短暂保存1-2 周对抗体活性是没有影响的。

如果抗体很快(1-2 )会使用,推荐在4 度保存,这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害。如果要长期保存则最好是在-20 or -80 度。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体

但是,腹水形式的产品请在收到后立即冻起来!因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4 度保存会导致抗体的降解!

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4. 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要1-2周的时间,所以是在4 度的条件下来完成的。4 度运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻。这就多了一次冻融的过程)。所以运输过程中绝对避免干冰运输!

特殊抗体的保存条件:

1. 酶联抗体:永远保存在4 度,避免冻起来。否则会导致酶活性的下降或者丧失

2. 偶联抗体:所有偶联抗体都是在棕色管中或使用锡箔纸避光保存。尤其是荧光抗体,对光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!

3. IgG3 的同型对照:永远保存在4 度,避免冻起来。因为如果出现冻融过程,该抗体非常容易形成多聚体

无论是保存还是运输,

反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!

抗体保存注意事项

抗体保存其它相关信息:

关于加入甘油保存:有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20 度会降低冰点。这对很多抗体可能是可行的。但是abcam 仅对非常小的一部分抗体检测过其在这种条件下的稳定性;abcam 只对按照推荐条件保存的抗体提供质量保证!加入甘油的溶液不建议在-80 度保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染!

关于蛋白保护剂:

蛋白在高浓度时更不容易降解(1 mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中加入BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。

关于叠氮化钠(sodium azide)的使用:




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