【求助】蔗糖密度梯度离心时，各梯度的体积该

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

一、梯度制备
手动自己铺的话一般先配置几个梯度，先加低密度的，再加高密度的，插入管底加液，一层层把低密度溶液顶上去，形成一个不连续的梯度点，然后去超速离心。这个时间比较长，铺一个离心管得20min左右，比较麻烦。
自动制备就简单多了，只需要把最低密度和最高密度1:1体积加入即可，仍然是先加低密度溶液，再加高密度溶液，推荐加拿大Biocomp全自动密度梯度制备仪，非常简单实用，最快1min可以制备6-8个离心管的线性密度梯度。

线性梯度可以明显提高分离度、提高不同组分之间的分辨率、增加条带个数、减少分离时间等。
而且机械制备梯度，均一性和重复性都很好，具有可比性。

我推荐机械制备，效果很不错的。

二、上样
一般，如果你上样0.3ml样品，吸出0.2ml梯度液体积即可，上样高度最高高不要超过条带最大分辨率的2.5mm。一般对于速度区带离心上样高度<1-3mm。
速度区带上样量小，密度梯度上样量大一些。

上述内容希望对你有帮助！
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