浅谈应用ARMS方法检测病理组织标本基因突变

作者：杨超月

随着医学研究的不断发展，对肿瘤的靶向治疗已更加成熟，而靶向治疗的前提是对药物的分子靶点进行基因检测。目前比较常用的检测方法主要有：直接测序法、PCR-RFLP、dHPLC法、及实时荧光PCR法等。本文简要讨论一下与实时荧光PCR法相关的ARMS技术。

突变扩增阻滞系统（amplification refractory mutation system，ARMS）是PCR技术应用的发展，用于对已知突变基因进行检测。其利用PCR引物的3’ 端碱基必须与模板DNA互补才能有效扩增的原理，设计等位基因特异性扩增引物，在严格的条件下，只有在引物3’ 端碱基与模板配对时才能进行PCR反应，从而检测出突变。利用ARMS技术合并荧光探针，在实时荧光PCR平台上对样本DNA进行基因突变检测，即为目前广泛应用的检测分子靶点基因突变的方法。

ARMS方法应用于病理组织标本基因突变检测的优势主要有以下几点：

1、检测灵敏度高，可达到1%，对于一些无法获得手术组织的患者，只能采取穿刺等方法进行诊断、检测，而以这种方式获得的标本组织量少，多数在满足病理诊断后已所剩无几，而ARMS方法的高灵敏度对这种类型标本的检测有很大优势。

2、病理组织标本为石蜡包埋标本，因甲醛的固定使得组织的DNA大部分片段化，ARMS方法在设计上缩短了目标产物的长度，适用于这种片段化的DNA标本。

3、该方法结合实时荧光PCR实现扩增时闭管操作，操作简单，无需产物的后处理，直接读取结果，避免扩增产物的污染。

4、由于实时荧光PCR检测系统已十分成熟，因此，检测结果数据的分析较简便快捷。

5、对于无法获得病理组织标本的患者，如能获得胸水等体液标本，也可尝试进行检测。

此方法也有不足之处：即试剂成本较高，并无法检测未知类型的突变。

综上所述，ARMS方法作为一种简便、快捷、高灵敏度的基因检测方法，已被广泛应用于靶向分子如EGFR、ALK、ROS1、KRAS、BRAF等基因的检测，在疾病的诊疗中起到重要作用。