细胞复苏是有小窍门的

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

细胞培养是指细胞在体外的培养技术，即在无菌条件下，从机体中取出组织或细胞，模拟机体内正常生理状态下生存的基本条件，让它在培养皿中继续生存、生长和繁殖的方法。通过细胞培养我们可以获得大量的、性状相同的细胞，以便于研究细胞的形态结构、化学组成及功能和机制。

细胞真的很脆弱，就像小婴儿一样，需要你无微不至的关怀。

细胞培养的开始，就是复苏细胞。如何有条不紊地让细胞从沉睡中苏醒？今天就来给大家总结几个实用小技巧，快点来get！

细胞复苏流程：

1、将冻存的细胞从液氮罐中取出，立即放入37°C的水浴中进行融化，轻柔晃动，加速融化，直到小瓶中只剩下一小块冰，时长应控制在1min中；

2、用70%乙醇擦拭瓶外后转移无菌操作台中，打开瓶盖前，用酒精灯火焰对瓶口进行消毒；

3、将预加热的新鲜完全培养基滴入小瓶中。缓慢用移液枪吸取瓶中液体至15ml离心管中，加入适量浓度和体积的完全培养基，轻柔混合均匀；

4、200 × g左右细胞悬浮液离心5-10分钟。实际的离心速度和持续时间因细胞类型而异。弃掉上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞，并将其转移到适当的培养容器和推荐的培养环境中。

细胞复苏是有小窍门的

细胞解冻流程图

注意事项：

1、液氮温度低，小心低温对人造成的伤害，在液相中储存的冷冻瓶在解冻时存在爆炸的风险，因此，取出冻存管的时候，要做好个人防护。

2、通常细胞集中储藏在液氮中，取出时应迅速，避免温差对其他冻存细胞造成影响。

3、复苏细胞的核心技术，简而言之就是快融，将在37°C水浴中快速解冻冷冻细胞(< 1分钟。

4、解冻时，冻存管先放入无菌一次性PE手套中，再放入水中融化，避免污染也方便操作。

5、用预热过的培养基慢慢稀释解冻的细胞。

6、解冻细胞后，在培养皿中培养时，应尽量维持高密度，以提高细胞存活率。

7、注意无菌操作，避免细胞发生污染。

在细胞培养领域，一直有一款进口血清，被众多实验室、代理商公认的: 十数年来，品质精良，质量可靠，供货有保障，性价比很高的进口血清，她的好口碑多来自于实验室口口相传，很多难养的细胞，一直对她情有独钟，她就是今天的主角，进口的Ausbian血清品牌，

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