【评测】造血干细胞培养基

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

大家都知道，影响脐血CD+34细胞体外扩增的因素有很多,纵观近年来，关于基础研究结果发现了一系列有助于扩增HSC的培养体系及添加物，如细胞因子（SCF、TPO、FLT-3L、IL-3、IL-6、G-CSF等）、与基质细胞共培养，以及添加一些小分子物质（前列腺素E2）等，又或者进一步纯化脐带血干细胞以其获得体外扩增，但是这些方法获得的HSC仍不能满足临床需要。ZePingBio代理的LONZA推荐使用其明星产品X-VIVO系列无血清培养基作为替代培养基培养造血干细胞。其中X-VIVO 15 系列，支持包含造血干细胞、单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等多种细胞的增殖。

视频：用Nanolive的3D Cell Explorer检测CD34+造血干细胞的有丝分裂

TheraPEAK™ X-VIVO™ x-vivo™系列免疫细胞无血清培养基

免疫细胞在细胞和基因治疗中有着非常广泛的应用，无血清培养基是免疫细胞培养中一个非常关键的环节。在整个过程中，免疫细胞培养基的安全性和一致性尤为重要，在短时间内获得高产量和高质量的效应细胞，成为细胞和基因治疗的重要步骤。基于此，Lonza开发了 X-VIVO系列免疫细胞无血清培养基产品。

X-VIV010无血清免疫aOHQiS养基

为LAK细胞在无血清环境传代而设计。可培养众多细胞：

•PBL、NK、LAK、T细胞、造血干细胞、巨噬细胞和单核细胞；

•含重组人胰岛素、人转铁蛋白和白蛋白；

,蛋白浓度1000ug/mL

X-VIV015无血精免疫细胞培养基

支持由外周血和人肿瘤分离纯化的CD3+细胞的增殖，以及：

•PBL、DC、CIK、NK、LAK, TIL、T细胞、造血干细胞、巨噬细胞、单核细胞、淋巴细胞、粒细胞、

HUT-78和相关的人淋巴细胞细胞系；

•含重组人胰岛素、人转铁蛋白和白蛋白；

•蛋白浓度2000ug/mL

X-VIVO 20无dn清免疫细胸培养基

支持由外周血和人肿瘤分离纯化的CD3+细胞的增殖，以及：

•PBL、DC、CIK、NK、LAK、TIL、T细胞、造血干细胞、巨噬细胞、单核细胞、淋巴细胞、粒细胞、

HUT-78和相关的人淋巴细胞细胞系；

•含重组人胰岛素、人转铁蛋白和白蛋白；

•蛋白浓度2000ug/mL

所有X-VIVO系列培养基药物主文件已提交至FDA

Primary human CD4 and CD8 T cells were mixed at a 1:1 ratio, activated with CD3/28-coated beads, and cultured in RPMI, AIM V CTS and X-VIVO™ 15 with no serum (circles) and with serum (squares). The population doubling rate was measured by cell counting on the days indicated by a symbol. Error bars represent SEM.Adapted from Medvec R.et al.Improved Expansion and In Vivo Function of Patient T cells by a Serum-Free Medium. Molecular Therapy: Methods & Clinical Development. Volume 8, P65-74. March 2018. https:// doi.org/10.1016/j.omtm.2017.11.001 ,CC BY 4.0.

为满足细胞治疗行业对于安全性和高标准生产的需要，LONZA公司的X-VIVO系列提供两种类型的培养基：所有的TheraPEAK™ X-VIVO™培养基均根据医疗器械法规(包括21 CFR Part 820 )进行生产，生产工厂已通过FDA的IS。13485认证质量管理体系注册。用于进一步生产用途的GMP配方不含抗生素、不含酚红, 均标记FFM (For Further Manufacture)o用于科研使用的培养基含抗生素和酚红，仅标记RUO(Research Use 0nly)。

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RUO和FFM两种类型IS养基的区別:

X-VIVO部分参考文献

Nature Biotechnology (2019). doi: 10.1038/s41587-019-0325-6

Polymer-stabilized Cas9 nanoparticles and modified repair templates increase genome editing efficiency. (聚合物稳定的Cas9纳米IR粒和修饰的修复模板可提高基因组编辑效率)

作者：Nguyen, D. N.1,2 , Roth, T. L.,2, et al.

单位：1.Department of Medicine, University of California, San Francisco, San Francisco, CA, USA.

2.Department of Microbiology and Immunology, University of California, San Francisco, San Francisco, CA, USA.