Charles River细胞株检定完整解决方案助力新药顺利

作者：张馨予

Charles River细胞株检定完整解决方案助力新药顺利推进中美双报

2022-02-21 10:51 来源: 本地红姐晓天下

原标题：Charles River细胞株检定完整解决方案助力新药顺利推进中美双报

细胞系/株

检定之旅

Charles River

Cell Line Characterization

开启细胞系检定之旅

PART.1 为什么要进行细胞系/株检定？

对于用作生产生物药物的 哺乳动物细胞、微生物和昆虫细胞等，需要进行广泛的细胞检定。这包括表型或基因型检测以及各种外源因子检测。

主细胞库（MCB）和工作细胞库（WCB）的建立以及这些细胞库的后续检定为未来生物制品的生产奠定了基础。正确的表征及检测至关重要，因为它们提供了证据，证明细胞库中没有污染物，并且能够为未来数年的生产过程提供坚实、稳定的基础。

PART.2 为什么要选择合适的服务商进行细胞系检定？

对不同细胞系/株的具体检测建议将根据细胞系的物种（例如仓鼠、人、鸡、大肠杆菌、巴斯德毕赤酵母）及其 预期用途（例如重组蛋白生产、疫苗生产、基因治疗）而有区别。此外，有关细胞系的来源和开发历史以及细胞生物学特性的文件内容，决定了应进行何种检测。

进行测定时，指南建议 使用经过验证的检测程序，以表明其对预期目的的适用性。

对于同一细胞系/株的检项可能多达40-50项，因此， 与经验丰富的公司合作以确定有效且高效的细胞系检定计划非常重要。

PART.3 微生物细胞库检定

纯度和鉴别检测

监管指南建议进行纯度检测，以确定细胞库中是否存在污染生物。

微生物细胞库的纯度检测包括在各种孵育条件下在多种类型的营养琼脂平板上筛选多种可能的污染物。

确保微生物细胞库中不含噬菌体也很重要。通过丝裂霉素C诱导或暴露于紫外线照射来检测污染的噬菌体。

如果细胞库使用任何植物来源的材料制成，建议进行螺原体（Spiroplasma）检测。

为了进行准确的物种鉴别，可以使用基因型和蛋白质型鉴定方法。

活力（Viability）检测

在预定条件下，细胞库稳定性的证据是下游生产的重要标准。细胞活力检测可通过在营养琼脂平板上对保藏的细胞进行连续稀释而对菌落形成单位（CFU）进行定量来进行该检测。

质粒稳定性分析

重组微生物细胞库需要稳定的宿主-载体表达系统，以连续生产蛋白质。应通过质粒和转录组测序、拷贝数分析、重组构建体的保留、选择标记的保留以及限制性内切酶分析来评估稳定性。

微生物细胞系检定——常规推荐的检测计划

PART.4

哺乳动物、昆虫、禽类和

其他细胞系/株检定

鉴别检测

对用作世界杯2022预选赛积分榜生产、疫苗生产或细胞治疗所用的基质细胞系进行鉴别检测，侧重于基因型分析的方法包括多位点序列分析、DNA指纹图谱、STR分析和染色体核型分析等。

纯度检测

无菌

使用两种不同培养基的直接接种方法，检测细胞库和收获液材料中是否存在细菌和真菌污染物。人用药品注册技术国际协调会议（ICH）建议对来自细胞库的至少1%或至少两支冻存细胞进行检测。

柔膜细菌（mollicutes）

传统的细胞培养方法涉及通过在支原体肉汤中孵育来测试可培养的支原体种类，并使用营养琼脂平板进行平行测试。