克隆及克滴水架隆技术

作者：张馨予

克隆是英文Clone一词的单译，意为无性繁殖系，即通过无性繁殖（如细胞丝分裂）可连续传代并形成的群体，常用于细胞水平的描述。克隆技术（Cloning）则指由众多的基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或细胞的技术操作。如基因克隆是指某种目的基因的分离过程，通常是将生物材料的遗传物质如DNA以酶切成片断，插入到载体中，通过无性繁殖（细菌或细胞的倍增）使其扩增，然后再以某种探针选择、钓取目的基因。细胞克隆技术在制备单克隆抗体的B淋巴细胞杂交瘤技术中运用的最为充分，永生性骨髓瘤细胞与某种抗体生成细胞融合后，接种于多孔板或软琼脂上，生成的细胞集落性状各不相同，采用特定的标记抗原即可筛选到产生目的抗体的杂交瘤细胞系。上述基因克隆技术及细胞克隆技术是现代生物技术的关键技术，也是现代肿瘤生物治疗中的重要技术。

克隆羊的产生及其技术

哺乳动物的克隆是克隆概念在个体水平上的应用，即通过无性繁殖所产生的动物个体或群体，它们具有完全相同的遗传背景。同卵孪生的遗传背景是相同的，但它们来自有性繁殖，即由受精卵发育而成。同一胚胎分割产生的个体遗传背景亦是相同的，但来源于未分化的多能胚胎干细胞，是有性繁殖的继续。真正的克隆个体，其遗传背景除与单供体相同外，其遗传物质应来源于已分化的体细胞，而非胚胎细胞。哺乳动物个体的克隆技术是若干细胞工程技术的组合和优化。首先是采集卵子，并通过显微操作使核质分离，使卵失支原有的遗传物质，仅余细胞质；其次采用细胞融合技术，使供体的乳腺组织细胞的核移入到无核卵细胞中；核质融合的卵通过体外培养发育为早期胚胎并移植入假孕母体子宫中发育为个体。这里至少采用了核质分离、细胞融合、体外培养及胚胎移植等技术，而且必须密切衔接，充分优化。