胎牛血清的常见FAQ



Q1. 应该如何储存和解冻血清不会使产品质量受损?

建议血清应保存在-20℃,若一次无法用完一瓶 ,无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。解冻时,建议将血清从冷冻室先移至 2-8℃冰箱解冻。再放置于室温进行彻底解冻。请注意,解冻过程中需要经常摇晃混合。不推荐将 FBS在37℃长时间孵 育解冻。

Q2. 培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗?

一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时 ,您应该在2周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

胎牛血清的常见FAQ

Q3. 如果我的FBS到达时已部分解冻,还能使用吗?

海星生物Hycyte™筛选胎牛血清全部都在冰冻状态下由干冰运输,因此您收到时应该仍是冰冻状态。如果只是部分解冻,FBS仍然可以使用,但是建议先将FBS在冰箱中充分解冻,之后通过温和的摇晃进行混合,再移至-20℃进行储存。

Q4. 不同批次血清颜色为什么有差异?

血中含有微量的血红蛋白,与采集血液过程中细胞的破裂数目有关。只要血红蛋白的含量在药典规定范围内,颜色的深浅和血清品质无关,不影响细胞培养。国家药典规定≤20mg/dL(注:1dL=100ml) 也写作<0.02%(w/v)。

Q5. 热灭活是必须的吗?

实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染。热灭活过程中局部温度过高,摇晃不均匀灭活时间过长,都会造成血清品质下降。若非必须,可以不需要做热处理这一步,不但节省时间,更确保血清的质量!

胎牛血清的常见FAQ

Q6. 如何进行血清的热灭活?

灭活之前必须先摇匀解冻的血清并恢复到室温

(1)取部分摇匀的血清(50ml离心管),选用同规格的对照管一个。

(2)对照管内放入与血清等体积的水。

(3)温度预试:对照管内插入温度计,显示56℃时,将恢复到室温的血清,放入水浴锅。灭活过程中,经常轻轻晃动摇匀(如每隔5min),保证温度均一。

Q7. 细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?

一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染, 微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在显微镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:

(1)细胞生长过老,破碎的细胞碎片;

(2)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;

(3)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除;

(4)血清等级不足以维持细胞良好的生长。

胎牛血清的常见FAQ

Q8. FBS 中含有的絮状物是什么?

FBS中的絮状物可能由很多种原因造成,其中最常见的沉淀主要成分是纤维蛋白和脂蛋白,不会影响血清品质,但必须去除,因为沉淀会影响细胞与细胞之间的联系,诱导细胞聚集,影响细胞贴壁等。

如要去除絮状物,在 4℃解冻后,首先混匀血清 4℃静置 30min-1h,让沉淀自然沉降到瓶底或管底。中上层无沉淀血清直接转出使用,下层血清转到50ml 无菌离心管 1000rpm(约400g),离心3-5min即可除去。

Q9.如何选择适合的血清 ?

市面上的胎牛血清大部分来于澳洲、南美。昂贵的澳洲血清培养娇贵细胞(如:小鼠 ES、原代细胞分离培养),南美(乌拉圭)血清或国产胎牛血清用于癌细胞、常规细胞系培养(用量最大)。

海星生物技术团队经细胞培养和检测推出了三款不同类型的筛选血清:

特点:☆ 无任何病毒污染 ☆ 不含激素、抗生素

☆ 无外源添加因子 ☆ 质量稳定、性价比高

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作者:海星生物

公众号:海星巴西vs瑞士让球 / 苏州海星生物

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