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真核细胞同源重组法

1994 年,Graham F建立了在293细胞同源重组产生重组腺病毒的方法。这个方法需要2个质粒:骨架质粒含有腺病毒绝大部分基因组序列,但不含有包装信号;穿梭质粒含有ITR、包装信号和目的基因克1隆位点,以及两段与骨架质粒有重叠的序列。将目的基因克1隆到穿梭质粒,与骨架质粒共转染293细胞,由于这两个质粒的部分序列有重叠,能够在细胞内发生同源重组,zui终产生完整的载体基因组,并包装出重组病毒颗粒。该方法曾经被广泛使用,推动了腺病毒载体的发展。由于细胞内重组效率低,某些重组事件还可能产生可copy病毒(RCV),必需经过噬斑纯化才能获得正确的克1隆化的重组病毒,费时费力,正逐渐被其他方法替代。

腺病毒防治原则

腺病毒的甲醛灭活疫1苗已被用于某些人群的预防,而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫1苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致癌作用,人们对全病毒疫1苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒,可使水传播性结膜1炎爆发的危险性降至zui小,在作眼的检查时应严格无菌操作,对所用设备充分灭菌,也可控制流行性结膜1炎的发生。对腺病毒感1染的cure仍无有效medicine。




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