【求助】关于HAT培养基的配置

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

这是我们实验室以前做单抗时一些试剂6的配方，希望能对你有帮助：

不完全DMEM培养基：DMEM1袋，超纯水1000mL，NaHCO33.7g，用1mol/L
的盐酸调试PH至7.2~7.4，过滤除菌，分装4℃保存。
完全DMEM培养基：不完全DMEM培养基80mL，小牛血清20mL，双抗
溶液1mL。
HT培养基：完全DMEM培养基99mL，加HT贮存液1mL（100×）。
HAT培养基：完全DMEM培养基98mL，加HT贮存液1mL（100×），A贮
存液1mL（100×）。
氨基喋呤（A）贮存液（100×，4×10-5mol/L）：称取1.76mg氨基喋呤
（Aminopterin）溶于90mL超纯水中，滴加1mol/L的NaOH 0.5mL助溶，待完全
溶解后，加1mol/L HCL 0.5mL中和，再补加超纯水到100mL。0.22μm膜过滤
除菌，小量分装，-20℃保存。
次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷（HT）贮存液（100×，10-2mol/L H，1.6×10-3
mol/L）：称取136.1mg次黄嘌呤（Hypoxanthine，H）和38.8mg胸腺嘧啶核苷（Thymidine），加超纯水到100mL，置45-50℃水浴中使完全溶解，0.22μm膜过滤除菌，小分装，-20℃保存，临用前37℃水浴中溶解。
青、链霉素（双抗）溶液（100×，104单位青霉素，100mg链霉素/mL）：取
青霉素（钠盐）100万单位和链霉素（硫酸盐）1g，溶于100mL灭菌超纯水，小
量分装，-20℃保存。