针对N501Y等突变株的单抗研发与广谱性评价筛选技

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

　　近期，英国、南非等地出现的新冠病毒突变体引起全世界的关注，为应对新冠病毒新变种，全球数十个国家采取入境禁令，面对新出现的变异株疫情，严重挑战着治疗性单抗和疫苗的广谱性保护的效果。刺突蛋白是新冠病毒表面与人体细胞ACE2受体结合的部位，刺突蛋白受体结合域（RBD）有6个关键氨基酸，与细胞受体直接作用，N501正是其中之一。N501Y突变可能会提高病毒与人体细胞表面ACE2受体的亲和力，增强新冠病毒的传染力。科学家推测英国出现的突变株传染性提高70%，可能与N501Y突变有关。小鼠模型实验已经证实N501Y突变能够增强病毒与小鼠ACE2的亲和力。近日也有报道发现南非出现新的病毒突变体501Y.V2，该突变体也存在N501Y突变，该突变株已成为南非主要流行株。N501Y突变在不同地区增加迅速（图1）。

　　Figure1.N501Y突变在不同地区增加迅速

　　中国食品药品检定研究院和北京百奥赛图基因生物技术有限公司（百奥赛图）等合作研发出4株新冠中和性单抗，其中三株对N501Y突变的中和活性未受影响，而其中一株单抗03-1F9中和活性与野生株相比下降了6倍（图2），但是EC50仍然保持在0.97ng/ml水平。目前该团队仍在继续采用人源化抗体基因完整性替换的RenMab®小鼠和Beacon技术研发新冠中和单抗，并采用包括多种突变和流行毒株的假病毒库技术筛选，希望获得对不同突变和流行株有广谱保护效果的候选治疗性单抗用于临床。

　　Figure2. 单抗对野生株与N501Y突变株中和活性EC50比值

　　根据新冠病毒的流行和变异特点，中检院前期构建了含106种变异株的新冠假病毒库（发表于Cell）。利用该技术对不同变异株进行研究，发现D614G突变可以是使病毒感染性提高10倍左右，某些突变会对单抗产生逃逸。针对新突变株和流行株构建假病毒，是一种生物安全、快速、高效的技术策略，可以用于单抗广谱性筛选、评价，以及疫苗广谱保护效果评价等。

　　Cross-neutralizing activity of monoclonal antibodies against N501Y mutant strain of SARS-CoV-2, Journal of Applied Virology. 2020,9(4):41-45. DOI: https://doi.org/10.21092/jav.v9i4.90