5p通过靶向作用于Ⅰ型胶原α1对结肠癌细胞的迁移



郑光威;方志鹏;林劲权;林振吕;郑建涛

来源:

中华实验外科杂志 2021 年 38卷 8期

标签:

微小RNA 结肠癌 迁移 侵袭 MicroRNA Colon cancer Migration Invasion

目的:探讨微小RNA-642a-5p(miR-642a-5p)对结肠癌细胞株SW620细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:将人结肠癌细胞SW620细胞分成4个组:对照组(OE-NC+mimic-NC组:共转染miR-642a-5p mimics阴性对照与空载体);过表达miR-642a-5p组(OE-NC+mimic-miR-642a-5p组:共转染miR-642a-5p mimics与空载体);过表达miR-642a-5p与Ⅰ型胶原α1(COL1A1)组(OE-COL1A1+mimic-miR-642a-5p组:共转染miR-642a-5p mimics与COL1A1过表达载体);过表达COL1A1组(OE-COL1A1+mimic-NC组:共转染miR-642a-5p mimics阴性对照与COL1A1过表达载体)。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞内miR-642a-5p及COL1A1的表达;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法(Western blot)实验检测细胞内COL1A1蛋白表达。两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:RT-PCR结果显示应用miR-642a-5p mimics转染细胞后,miR-642a-5p表达水平显著增加;双荧光素酶报告基因实验结果miR-642a-5p直接靶向作用于COL1A1。应用(COL1A1 overexpression,OE-COL1A1)转染后,细胞COL1A1表达水平明显增加。而OE-NC + mimic-miR-642a-5p组和OE-COL1A1 + mimic-miR-642a-5p组的RNA相对表达量(18.62±2.31),(2.52±0.44)明显

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