透析用水·透析液液细菌培养，必须掌握的几点

作者：张馨予

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“女神节，

愿身边和远处的女性朋友

身体健康，万事顺意，开心快乐！”

“水”，在血液透析治疗中占据“龙头”效应，一次透析大约使用120升水，绝大部分水来源于透析用水，进而与浓缩透析液按一定比例进行混合后，各项指标合格（如，细菌、内毒素，电导度和温度、pH值等），其中“细菌培养”所用培养基，不能使用血培养基，而应该使用寡营养基（如TGEA、R2A），合适的培养基培养的结果才是可信的，才是可以持续改进的依据之一。今天和大家一起学习TGEA方面的知识点！

透析中心没有合格的“水”，停业整顿离着就不远了，保证“水”的合格的同时，还应该高质量的进行检测并评价，不存侥幸，实事求是地完成我们每一项关乎生命的工作。

首先，为什么关注“水液”的细菌问题？

在水和透析液中，常见的细菌是革兰阴性菌和非结核性分枝杆菌，他们特别适合在水中生存。革兰阴性菌在透析用水和透析液有合适的温度、营养和pH时，他们能很快繁殖，如果透析膜出现破坏，细菌就可以进入患者的血液中，引起毒血症。即使透析膜不破，细菌的产物和细胞膜的成分也可以通过透析器膜孔进入血液，引起患者的致热源反应，使患者出现发热、寒战、低血压、恶心等症状，严重的导致患者死亡。

至于如何杀死细菌？如加热、化学杀菌，也可以被一些系统过滤掉。（这部分设计水处理及供水管道的消毒，这里暂不讨论，欢迎留言！）

关于细菌培养：

根据行业标准YY0572-2015及2021版SOP要求：透析用水及透析液的细菌培养标准：如下图：“透析用水和透析液，细菌总数不超过100CFU/ml，超过50%，应进行干预”

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【重点】“细菌总数”如何准确获得？

可选择胰化蛋白胨葡萄糖（tryptone glucose extract agar，TGEA）培养基、R2A 营养琼脂培养基或其他确认能提供相同结果的培养基，不能使用血琼脂培养基和巧克力琼脂培养基。

【培养条件】17～23℃的培养温度和7d 的培养时间。

【合适的培养基】常用TGEA/R2A 简介

TGEA配制和使用方式 [3]：（一般机构，其配制和培养由检验科完成；需要透析中心做的：确认培养基和排样方法与标准的一致性）

1、适用于水中或奶类产品的细菌数量检测及探测噬热微生物。

2、配方：

牛肉抽出物(Beef extract) 3.0克

胰化蛋白胨(Tryptose) 5.0克

葡萄糖(Glucose) 1.0克

琼脂(Agar) 15.0克

pH值 7.0±0.2

3、使用方法：

将上述24g的成份溶于1升的蒸馏水里，煮开至成份完全溶解。采用高压灭菌方法在121°C温度下消毒15min，冷却至50℃左右后倒进培养皿里，室温下凝固。

4、备注参考：

此份量的培养基可制备50只培养皿（以每只培养皿20ml计算）。如用户认为此份量过多，可按比例将份量減少。例如:24g可溶于1L蒸馏水，可制备50 只培养皿；12g可溶于500ml蒸馏水，可制备25只培养皿；6g可溶于250ml蒸馏水，可制备12.5只培养皿，以此类推。

5、储存条件 (只适用于商品性TGEA培养基)干燥的培养基应储存于25摄氏度以下，并在有效期前使用。

制成后的培养基应以塑料袋密封并于2～8摄氏度储存，保存期为14天。

“开始下面学习之前，先邀请您做个小调查”（单选）

【正确的采样方法】 [3]

反渗水采样方法

①使用反渗水循环管道末端的采样口或者把透析机连接到循环管道处的软管拆下(如果在此处安装有采样口，可直接取样)。

②打开反渗水球阀，用反渗水冲洗球阀内部30s。

③用70%的酒精消毒反渗水管球阀下的接头外侧，最好连续消毒两次。