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概括：这道题是丰估吓同学的课后生物练习题，主要是关于电泳，指导老师为冉老师。电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成， 是电泳场中的导体，也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件。其成分及其离子强度影 响物质的电泳迁移率，应避免与被分离的样 品发生化学反应而改变样品的理化性质或使 其丧失生物活性。电泳缓冲液中的EDTA 可螯合Mg离子等二价阳离子，防止电泳时激 活DNA酶及Mg离子与核酸生成沉淀。
题目：电泳解：主要注意一下几点：
凝胶正负极不要弄反向了,
控制电压及电泳时间,严控条带跑出
点样时,点样量不要溢出点样孔,注意枪头捅破点样孔的凝胶.
电泳时需要marker做对照,用于验证目拟标片段的大小,
电泳缓冲液需定期更换
相信做到以上几点,应该问题不大
参考思路：电泳涂装我知道，是这个吗？
举一反三例1： 蛋白质电泳制胶要注意哪些方面[语文练习题]思路提示：
总结平时的实验经验,大概需要注意以下几条：
1.玻璃板需要清洗干净,不然蛋白质在凝胶中电泳会受到阻碍.一般用软布在自来水下清洗后用蒸馏水洗一下,或者直接偷懒的办法就是拿酒精棉球擦擦.
2.确保制胶所用试剂有效.
3.根据你的目的蛋白分子量确定胶的浓度.
一般采用如下：
蛋白分子量大小（kd） 凝胶百分比(10%)
4-40 20
12-45 15
10-70 12.5
15-100 10
25-200 8
4.水封：一定要注意缓慢加入水,不然由于冲的厉害,很容易最后胶不平.好的办法就是用乙醇封.
5.由于梳子质量问题,两边的“耳朵”容易断掉,这样两边的孔容易漏出,建议插梳子以后在梳子的上方再多加一些浓缩胶.
乐研生物,
例2： 电泳做凝胶回收时应注意哪些细节?我要做dna胶回收,查到一些方法,但是一些技术上的问题写的不清楚,希望能得到一些有价值的建议.以提高胶回收的效率[生物练习题]思路提示：
DNA胶回收,应该就是琼脂糖电泳的吧?首先要确定方法,是试剂盒还是自己配的试剂,试剂盒的话有protocal,照着做就是了,自己配的呢操作流程也跟试剂盒差不多,基本上都是切胶--加热溶解--上柱结合--洗涤杂质--去离子水洗脱 其次需要注意的就是相对应的几个环节呢,首先电泳缓冲液一定要是新的,保证所用的器具的洁净,包括刀片,避免污染,倒的胶尽量比平时厚,保证样品全部上完,其次避免紫外的长时间照射,切胶的时候尽量少切胶,上柱结合的时候洗涤液一定要记得加酒精,洗涤后多敞洗脱液一般用去离子水30-50ul,可以洗两次.
例3： 使用醋酸纤维素薄膜电泳的注意事项,[生物练习题]思路提示：
1、醋酸纤维素薄膜的预处理
市售醋酸纤维素薄膜均为干膜片,薄膜的浸润与选膜是电泳成败的重要关键之一.将干膜片漂浮于电极缓冲液表面,其目的是选择膜片厚薄及均匀度,如漂浮15s—30s时,膜片吸水不均匀,则有白斑点或条纹,这提示膜片厚薄不匀,应舍去不用,以免造成电泳后区带扭曲,界线不清,背景脱色困难,结果难以重复.由于醋酸纤维薄膜亲水性比纸小,浸泡30min以上是保证膜片上有一定量的缓冲液,并使其恢复到原来多孔的网状结构.最好是让漂浮于缓冲液的薄膜吸满缓冲液后自然下沉,这样可将膜片上聚集的小气泡赶着走.点样时,应将膜片表面多余的缓冲液用滤纸吸去,以免缓冲液太多引起样品扩散.但也不能吸得太干,太干则样品不易进入薄膜的网孔内,而造成电泳起始点参差不齐,影响分离效果.吸水量以不干不湿为宜.为防止指纹感染,取膜时,应戴指套或用镊子.
2、缓冲液的选择
醋酸纤维素薄膜电泳常选用pH8.6巴比妥溶液,其浓度为0.05mol/L—0.09mol/L.选择何种浓度与样品及薄膜的薄厚有关.选择时,先初步定下某一浓度,如电泳槽两极之间的膜长度为8 cm—10cm,则需电压25V/cm膜长,电流强度为0.4mA/cm—0.5mA/cm膜宽.当电泳达不到或超过这个值时,则应增加缓冲液浓度或进行稀释.缓冲液浓度过低,则区带泳动速度快,并由于扩散变宽；缓冲液浓度过高,则区带泳动速度慢,区带分布过于集中不易分辨.
3、加样量
加样品的多少与电泳条件、样品的性质、染色方法与检测手段灵敏度密切相关.作为一般原则,检测方法越灵敏,加样量则越少,对分离更有利.如加样量过大,则电泳后区带分离不清楚,甚至互相干扰,染色也较费时.如电泳后用洗脱法定量时,每厘米加样线上需加样品0.1μl—0.5μl约相当于5μg—1000μg蛋白.血清蛋白常规电泳分离时,每厘米加样线加样量不超过1μl,相当于60μg—80μg的蛋白质.但糖蛋白和脂蛋白电泳时,加样量则应多些.对每种样品加样量均应先作预实验加以选择.
点样好坏是获得理想图谱的重要环节之一,以印章法加样时,动作应轻、稳,用力不能太重,以免将薄膜弄坏或印出凹陷而影响电泳区带分离效果.
4、电量的选择
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