37b基因真核表达载体的构建与表达

作者：张馨予

【动物造模】-人IL-37b基因真核表达载体的构建与表达

动物造模 z-bio 2022-06-08 3

　　目的：构建pEGFP-N1/IL-37b真核表达载体,并检测其在THP-1细胞中的表达情况。

　　方法：从人PBMCs中提取总RNA,利用RT-qPCR技术扩增出IL-37b基因编码区序列,克隆至pEGFP-N1真核表达载体,将构建的重组质粒pEGFP-N1/IL-37b转染到THP-1细胞中,通过RT-qPCR和Western blot检测IL-37的表达。

　　结果：双酶切及基因测序结果显示IL-37b基因正确插入真核表达载体pEGFP-N1中;RT-qPCR和Western blot结果显示转染THP-1细胞后,IL-37表达水平明显升高(P < 0.01)。