Ppia基因敲除小鼠与免疫研究【每周一鼠】

作者：杨超月

赛业生物《每周一鼠》，每周五更新，为大家讲解一个小鼠模型的故事，希望对大家了解不同的小鼠模型有所帮助。今天和大家见面的是Ppia基因敲除小鼠。

Ppia基因

该基因编码肽基脯氨酰顺反异构酶（PPIase）家族的成员。其编码的蛋白质是一种环孢菌素结合蛋白，可能在环孢菌素A介导的免疫抑制中发挥作用。该蛋白还可以与几种HIV蛋白相互作用，包括p55gag、Vpr和衣壳蛋白，并且已被证明是形成感染性HIV病毒粒子所必需的。其相关通路有催乳素信号通路。

图1. Ppia蛋白结构【6】。

Ppia基因敲除小鼠

1●免疫异常表型

Colgan J等人通过ES打靶技术，敲除Ppia基因1~4号外显子及部分5号外显子序列得到Ppia敲除小鼠（图1）[1]。研究发现，Ppia敲除小鼠（Ppia-/-）会自发出现眼睑肿胀、红斑，3月龄出现眼睑缘炎症，髓年龄增长病情加重。结膜和皮肤有单核细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞浸润，血清IgG1和IgE含量升高。KLH（Calbiochem）免疫10天后，血清抗原特异性IgG1和IgE含量升高（图2）[1]。

图2. Ppia−/−小鼠的免疫异常表型。

图注：（A）：Ppia敲除小鼠打靶策略与鉴定。(B)：Ppia-/-小鼠的眼睑炎症。(C)：苏木精/伊红染色切片显示 Ppia-/-眼睑 (40×) 中的细胞浸润。(D)：用刚果红（左；600×；箭头，嗜酸性粒细胞）或甲苯胺蓝（右，400×；箭头，肥大细胞）染色的Ppia-/-眼睑。(E)：未免疫小鼠中血清 IgG1和IgE的浓度。(F)：KLH免疫小鼠血清中的相对抗原特异性抗体和IgE浓度。

2●抗病毒表型

Liu W等人用SeV病毒（仙台病毒）感染5只WT小鼠和5只Ppia-/-小鼠，5只Ppia-/-小鼠在感染9天后全部死亡，WT小鼠存活3只并保持健康。病理解剖学发现，SeV感染的Ppia-/-小鼠的肺指数高于WT小鼠，肺脏损伤严重。组织病理学结果表明，SeV感染的Ppia-/-小鼠表现为严重的支气管肺炎、间质性肺炎、血管充血并且脱落，WT小鼠仅表现为轻微的支气管肺炎和血管充血。Ppia-/-小鼠肺中病毒载量更高，并且肺和脾脏中一型干扰素和下游ISG含量降低（图2）。结果表明，Ppia通过增加IFN和下游ISG的表达来抑制体内SeV复制[2]。

图2. Ppia抗病毒反应。

图注：(A)：通过鼻腔接种感染SeV (2000 PFU/小鼠)，并监控感染后14天内WT和Ppia-/-小鼠(n = 5)的存活率。(B)：感染 SeV2天和7天的WT和Ppia-/-小鼠 (n = 5) 的肺指数 (100×肺/体重)。(C)：用SeV接种7天的WT和Ppia-/-小鼠肺部的总体损伤。(D)：感染SeV或模拟感染PBS 2、5和7天的WT和Ppia-/-小鼠 (n=3) 的肺的H&E染色。比例尺，100μm。（E）：在指定时间点用 SeV处理的WT或Ppia-/-小鼠中SeV NP或M mRNA的定量PCR分析。(F)：用SeV处理指定时间点的WT或Ppia-/-小鼠肺组织中IFN-β和IFN-α 含量。（G和H）在指定时间点用SeV处理的WT或Ppia-/-小鼠肺组织中Ifnb1、Ifna（G）、Ifit1、Ifit2和Ccl5（H）mRNA的定量PCR分析。数据显示为平均值±SD（B：n =5;E-H:n=3）。*p<0.05 和**p<0.01。

小结

小鼠Ppia功能丧失相关的免疫异常和抗病毒能力异常具有潜在的临床意义，这一基因的深入研究有助于进一步探讨病毒侵入机体及引发机体病理反应的机制，同时亦可用于病毒类疾病治疗新方法的研究。

赛业“红鼠资源库”涵盖基因敲除小鼠、条件性敲除小鼠及海量突变位点小鼠品系，强大的数据库给您更便捷的体验，研究人员能够在线查询、设计和优化基因编辑方案并比较研究数据和成果，并咨询订购。

“红鼠资源库”可以为您提供Ppia完全性敲除活体小鼠以及Ppia条件性敲除小鼠。

此外，开学季，基因敲除（KO）小鼠仅需10000元，条件性敲除（CKO）小鼠仅需20000元，模型定制+快速繁育，直接交付2对CKO纯合子+2对Flox纯合子，仅需39999元，助您赢回科研时间，节省科研经费，买到就是赚到！欢迎拨打400-680-8038咨询订购。

点击图片查看活动详情

参考文献：