师兄,为什么我的细胞培养液是紫红色?看完我



师兄,为什么我的细胞培养液是紫红色?看完我......

2022-03-19 18:43 来源: Happy Eng Class

原标题:师兄,为什么我的细胞培养液是紫红色?看完我......

实验室新来了一个师弟,老板让其从养细胞开始。这个小师弟是个夜猫子,总喜欢深夜做实验。一天早上:

小师弟:昨天传的细胞没贴壁,培养液变成紫红色的了。是不是你给我的那皿细胞是不好的?

科研狗:你操作没毛病?

小师弟:绝对没毛病,严格遵循你的指示。为了怕孵箱细胞太多,我特意单独放在另外一个孵箱里。

科研狗:等等,另外一个孵箱?没有接通CO2啊

今天我们来聊一聊培养液中的颜色, 一般情况下,我们购买回来的DMEM培养基都是鲜红色的,如下图:

但是,作为老司机的你肯定也见过如下颜色的:

还有这样颜色的:

小师弟:师兄,你见过赤橙黄露青蓝紫的吗?

科研狗:...

1. 为什么这个DMEM培养基是鲜红色的?

培养基的颜色主要是酚红来显示的,酚红指示颜色非常灵敏,p值范围为6-8,颜色由黄变为紫红。酚红不是必须的,在有些情况下甚至是多余的,酚红有类似固醇类激素的作用,如果涉及到固醇类激素相关的细胞培养,最好不要添加。但是为了培养方便,能让我们直观地感觉培养液的状况,加入酚红后,如果培养液偏酸了,就显示偏黄色,偏碱性了就显示偏紫色。

2. 为什么培养皿放在一个没有开启CO2的孵箱里面,培养液颜色偏紫色?

一般的DMEM使用的缓冲体系是NaHCO3, 初中的时候应该见过如下的方程

2NaHCO3=Na2CO3+CO2+H2O

在没有CO2的孵箱中,培养液中的CO2一直溢出,碳酸变少了,溶液变碱性了,就偏紫色了。同时我们打开了很久的DMEM瓶里面的培养液也会慢慢偏紫色,也就是这个道理。

4. 培养基偏紫色了还能用不?

可以将该偏紫色的培养基置于CO2孵箱中,拧松瓶盖。一段时间之后你会发现颜色变为鲜红色了,那么可以继续接着用。但是不要使用过长时间未用完并且变色的培养液,置于空气下氧化之后培养基成分可能已发生了变化。

今天,为了帮大家解决细胞新手面临的种种难题,预防未来更多的细胞被污染等问题,耽误我们发SCI。

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