猪流行性腹泻病毒（PEDV）：病毒学和血清学诊断
猪流行性腹泻病毒（PEDV）：病毒学和血清学诊断方法综述
2017-06-20 04:10 来源:猪业视角
原标题：猪流行性腹泻病毒（PEDV）：病毒学和血清学诊断方法综述
免责申明：本微信服务平台资料来源于网络收集，以供给大家学习、交流为目的，请诸位在阅读后，尽快删除，尊重资料原作者，支持正版。若所列资源侵犯了您的权益，请直接留言，立刻删除!
PEDV能引起猪的急性、高度传染性和严重的肠道疾病，会导致哺乳仔猪的高死亡率。2010年末，变异PEDV毒株导致我国PED的大暴发，造成了一百多万头仔猪的死亡。2013年美国也暴发了变异PEDV导致的PED。之后变异PEDV毒株导致了世界范围的PED大暴发，给全球生猪产业造成了灾难性的影响。及时准确的诊断是防控PED的关键之一，本文介绍了PEDV感染后的动力学、宿主反应特性以及PEDV的病毒学和血清学诊断方法。
一、我国PEDV遗传变异和流行情况简介
下图1为亚洲PEDV毒株基因组的高变区（图1A）和PEDV的基因组结构（图1B）。PEDV基因组中高变区主要位于NSP2、S、ORF3和N基因。因此PEDV分子诊断常依据较为保守的ORF1和M基因。同时由于经典和变异PEDV毒株的核苷酸序列的主要差别位于S基因，所以S基因可作为PEDV毒株的鉴别诊断。作为主要膜蛋白的S和M蛋白，常作为免疫诊断的靶标。
图1 亚洲PEDV毒株的高变区（A）和PEDV的基因组结构（B）（摘自Sun et al., 2015）
为了更好的诊断PEDV，首先要了解我国不同PEDV毒株的流行特点。我国PEDV毒株的遗传变异性较大，主要分为经典毒株和变异毒株两个大群，经典毒株又可以分为两个亚群（Ca和Cb）其中Ca主要是经典毒株的临床野毒株，Cb主要是由经典毒株衍生的疫苗毒株；变异毒株大群又可以分为三个亚群，分别为Va、Vb和Vc，其中Va为主要的亚群。不同类型毒株在我国大陆地区广泛分布，现阶段变异毒株中Va亚群为主要的PEDV毒株类型（图2）。
展开全文
图2 依据进化分析得到的我国大陆地区405株不同类型PEDV毒株的地理分布（摘自Chen et al., 2016）
二、PEDV感染的动力学和宿主反应特性
粪口传播感染后，PEDV在小肠上皮细胞中复制，很快导致感染细胞的破坏和坏死。经过一个孵育阶段（在仔猪中为1天，在3周大小的断奶仔猪中的时间为3-6天）就会观察到临床症状包括腹泻和呕吐，并且会持续5-10天（图3）。PEDV感染后很短时间就会发生排毒现象，这一过程可以长达24-30天。感染后的12h在1天大的仔猪和感染后14天的3周大断奶猪的十二指肠和回肠中能检测到病毒抗原。
PEDV感染6-14天就能检测到抗体。主要检测依据PEDV S和N蛋白的抗体反应。N蛋白特异性的IgM反应在感染后7天达峰值，S蛋白特异性的IgM反应在感染后的14天达峰值。N蛋白和S蛋白特异性的IgG反应在感染后第7天第一次检测到，这两种到达峰值的时间分别是21和14天（图3）。S蛋白特异性的分泌性（s）IgA动力曲线和S蛋白特异性的IgG反应类似，感染后7天能测到低水平反应，感染后14天到达峰值，维持时间可以长达6个月（图3）。PEDV特异性的抗体可以在口腔液中检测到。IgA似乎是口腔液中主要的抗体类型，感染后的100天都在不断的增加。PEDV的中和抗体在感染后的7-14天检测到，在感染后21天达到峰值（图3）。中和抗体能在感染后持续6个月的时间。病毒感染动力学和宿主反应特性对于诊断前的采样和样品的检测方法的选择十分重要。
图3 PEDV感染的动力学和宿主反应特性（摘自Diel et al., 2016）
三、PEDV的诊断
当今PEDV的诊断技术主要分为两种：病毒学和血清学诊断方法，下面我们简要的介绍一下这些方法的特点：
3.1 用于检测PEDV或其抗原的方法
3.1.1 PEDV分离
Vero细胞系是用于分离PEDV的主要细胞系。典型的细胞病变性（CPE）是细胞融合、形成合胞体最终细胞脱落。成功分离后主要通过免疫荧光（IF）和RT -PCR方法鉴定。
表1 不同PEDV诊断方法的特性分析
上一篇：制造简单 成本低廉 蛋白质新冠疫苗有望后来居上
下一篇：冬天，这鱼要多给家人吃，蛋白质比大虾还高，