威尼德紫外交联仪: Northern 、Southern 、EMSA等尼龙

作者：张馨予

1.Membrane Blotting(膜印迹)

威尼德巴西vs瑞士让球 (北京)有限公司VL系列紫外交联仪可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交联,当使用254 nm波长、能量为120.0mJ/cm2交联时,尼龙模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之间形成共价键最稳定。

(1)将一张或两张用转移缓冲液(如10×SSC)轻轻润湿的吸水纸放在VL系列紫外交联仪的样品腔。将尼龙膜放在吸水纸上,使附着的一面朝上,使紫外线灯管能够直接照射。

(2)关闭VL系列紫外交联仪的门。

(3)按下Run/Pause(运行/暂停)按键启动,当紫外线灯管亮时,显示屏将立即开始从输入值开始累计。如果在曝光期间的任何点打开门,照射将停止,并显示已曝光值。(关上门按Run/Pause按键继续照射。)

(4)辐照完成后,蜂鸣器将鸣响约3–4秒。自动交联大约需要25–50秒。

(5)取下尼龙膜并关上门,交联完成。每次使用后,清洁紫外线交仪样品腔,以清除残留的盐。威尼德巴西vs瑞士让球 (北京)有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三种波长制造了四款紫外交联仪,主要包括VL-1000A系列紫外交联仪(365nm)、VL-1000B系列紫外交联仪(302nm)、VL-1000C系列紫外交联仪(254nm)、VL-3000系列紫外交联仪(三种波长)满足不同的科研需求。

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2.DNA Nicking(DNA缺失)

威尼德巴西vs瑞士让球 (北京)有限公司紫外线交联仪也可用于切割溴化乙锭染色的琼脂糖凝胶中的DNA,代替HCl洗涤液,琼脂糖凝胶中比较大的DNA(>20kb)的转模效率很低,因此DNA在转移到尼龙膜之前需要进行前处理。DNA可通过HCl或紫外线照射进行切割。HCl脱嘌呤反应较难控制,且对温度极为敏感。所以在转移前,在短波长紫外光(254 nm)中80.0mJ/cm2切割DNA的方法更可靠。威尼德巴西vs瑞士让球 (北京)有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三种波长制造了四款紫外交联仪,主要包括VL-1000A系列紫外交联仪(365nm)、VL-1000B系列紫外交联仪(302nm)、VL-1000C系列紫外交联仪(254nm)、VL-3000系列紫外交联仪(三种波长)满足不同的科研需求。

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3.Sterilization(灭菌)

威尼德巴西vs瑞士让球 (北京)有限公司VL系列紫外交联仪,紫外线杀菌就是通过紫外线照射,破坏及改变微生物的DNA(脱氧核糖)结构,使细菌当即死亡或不能繁殖,达到杀菌的目的。真正具有杀菌作用的是UVC紫外线,因为C波段紫外线很容易被生物体的DNA吸收,尤其是254nm波长左右紫外线最佳。紫外线杀菌属于纯物理消毒方法,具有简单便捷、光谱高效、无二次污染。因此在短波长紫外光(254 nm)中灭菌95sec。威尼德巴西vs瑞士让球 (北京)有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三种波长制造了四款紫外交联仪,主要包括VL-1000A系列紫外交联仪(365nm)、VL-1000B系列紫外交联仪(302nm)、VL-1000C系列紫外交联仪(254nm)、VL-3000系列紫外交联仪(三种波长)满足不同的科研需求。

4.RecA Screening(RecA筛选)

紫外线交联剂也可用于筛选RecA突变体,在短波长紫外光(254 nm)中40.0mJ/cm2照射下,recA突变体阻止了紫外线诱导损伤的修复,阻止了紫外照射过的过的recA细胞的生长。威尼德巴西vs瑞士让球 (北京)有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三种波长制造了四款紫外交联仪,主要包括VL-1000A系列紫外交联仪(365nm)、VL-1000B系列紫外交联仪(302nm)、VL-1000C系列紫外交联仪(254nm)、VL-3000系列紫外交联仪(三种波长)满足不同的科研需求。

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