4000071121基于QPCR法的细胞与基因治疗临床试验概述

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

2022-04-13 21:40 来源: 迈杰转化医学

原标题：4000071121基于QPCR法的细胞与基因治疗临床试验概述

1、基于QPCR法的细胞与基因治疗临床试验概述

基因和细胞治疗领域在过去十年经历了显著的发展。对这些细胞和基因治疗试验品的临床前和临床安全性评估的需求，有效地增加了监管生物分布、载体脱落、基因表达和/或药代动力学生物分析研究的必要性。许多国际监管机构发布的指导文件建议使用定量聚合酶链反应(qPCR)和/或定量反转录PCR (RT-qPCR)检测方法，因为该方法具有高度敏感性和稳健的目标特异性。然而，这些文件中只对临床前生物分布分析的敏感性做了规定，但是，诸如准确性、精密度和可重复性等标准还没有定义。这种指导上的缺乏需要生物分析科学家进行持续的讨论，以围绕临床前和临床qPCR/RT-qPCR分析设计达成“最佳实践”共识。针对这一需求，作者在此总结了在开发、验证、运行样品和qPCR/RT-qPCR检测报告时需要考虑的关键问题。

在过去的15年中，美国食品和药品管理局(FDA)和欧洲药品管理局(EMA)积极制定和更新了监管指南，详细阐述了在评估非临床和临床研究方面的一般原则。这两家机构都推荐使用qPCR/RT-qPCR检测方法来分析载体生物分布、载体脱落和载体衍生的基因表达，因为该方法对检测给药核酸序列在较宽的可测量范围内具有较高的灵敏度和特异性。虽然FDA尚未要求qPCR/RT-qPCR检测方法的验证，然而EMA已经提出了这样的要求。随后，许多组织，包括生物分析最新问题研讨会和国际药品监管机构，一直致力于协调在方法开发、确认、验证和样品分析方面的全球实践方法。

目前，还没有关于实验设置或评价过程的概述建议，以确定验证的分析和后续样品分析的接受标准。因此，进行临床和非临床qPCR和RT-qPCR方法验证和样本分析的方法可以根据生物分析科学家的科学解释而有所不同。对于每天在学术、生物技术、制药和合同研究实验室工作的科学家来说，缺乏指导是非常现实的，他们致力于开发新的基因和细胞治疗方法，为无数未满足的医疗需求提供干预措施。为了满足这一需求，该领域的生物分析科学家试图提供他们对qPCR/RT-qPCR分析方法的开发和验证的见解，以支持生物分布和脱落样本的分析。

本文概述了对qPCR/RT-qPCR分析设计的“最佳实践”建议，强调了在方法开发、适合目的验证和样品分析过程中需要考虑的要点，并提出了检测方法的接受标准。

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