流式细胞术，想说爱你不容易

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

流式细胞术（Flow cytometry）是一种利用流式细胞仪快速定量分析细胞群的理化和生物学特性，以及分选特定细胞群的技术，广泛应用于生命科学基础研究和临床研究等领域。但是，流式检测实在是太复（折）杂（磨）了，尤其是对于刚接触流式的我，一不小心就晕头转向，简直让人想放弃。。。。。。

且慢，作为一只百折不挠的科研汪，怎能轻言放弃？本汪凭借多年积累的搜索技巧，发现想要了解流式检测，首先可从以下几个方面着手：

一、样品制备
样品制备是影响流式检测分析结果是否准确的关键因素之一。对于流式检测，必须要制备单细胞悬液。在处理不同组织时，应尽可能采用对细胞损伤小、产率较高的单细胞悬液制备方法，最大限度地保持原有细胞特性。另外，流式检测的样品必须是新鲜采集的，液氮冷冻保存或固定处理后的样品都不能用于流式检测分析。

二、荧光素选择
常见的荧光素种类有 FITC（异硫 qing 酸荧光素）、PE（藻红蛋白荧光素）、APC（藻青蛋白荧光素）、PerCP（多甲藻叶绿素蛋白荧光素）以及 Alexa Fluor 系列等。其中最常用的是 FITC，该荧光素较为稳定，由 488m 激光器激发，其发射的荧光信号被第一荧光通道（FL1）接收。PE 也是由 488nm 激光器激发，发射的荧光信号被第二荧光通道（FL2）接收，其荧光信号较强，是 FITC 的 30-100 倍，适用于对弱表达的抗原分子的分析。APC 却是由 635nm 激光器激发，故 488nm 单激光器的流式细胞仪无法分析 APC 的荧光信号。

三、补偿调节
做单色分析时，不需要荧光补偿。但是，当样品用 2 色以上荧光染色时，由于不同荧光素光谱之间存在着互相交叠现象，每一个荧光素在某种程度上都会在「错误」的检测器上显示出信号，为消除这种影响，就需要做荧光补偿。

只知道以上几点，对于流式检测是远远不够的，所以，还要从专业人员那里吸取宝贵的经验。这不，义翘神州将于 2019 年 5 月 16 日 14:00 举办在线讲座《流式细胞术实验精要及其在癌症研究中的应用》，想要早点「爱」上流式的童鞋，点击右侧报名链接，快来报名吧~

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