二硫苏糖醇的用途、注意事项以及保存方法– 苏

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

二硫苏糖醇（DTT）是一种小分子有机还原剂，化学式为C4H10O2S2。其还原状态下为线性分子，被氧化后变为包含二硫键的六元环状结构。DTT在上个世纪中期发现，这种小分子和水溶性试剂能够完全还原二硫化物，保护巯基免受氧化，并在还原状态下保存单巯基。作为一种有效的还原剂，主要用于临床和实验领域，也可用于某些疾病治疗，如胱氨酸病或由离子或金属毒性引起的医学病症。

二硫苏糖醇的用途

DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率；而在DNA溶液中加入DTT，反应一段时间后除去，就可以降低DNA的二聚化。

DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原，可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键，这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温加热或加入变性剂，如6M 盐酸胍、8M 尿素或1% SDS)。反之，根据DTT存在情况下，二硫键还原速度的不同，可以判断其包埋程度的深浅。

二硫苏糖醇的注意事项

由于容易被空气氧化，因此DTT的稳定性较差；但冷冻保存或在惰性气体中处理能够延长它的使用寿命。由于质子化的硫的亲核性较低，随着pH值的降低，DTT的有效还原性也随之降低，因此应控制体系的pH值。

二硫苏糖醇的保存方法

2-8℃冷藏保存。密封包装，避免潮湿、加热和阳光直晒的环境。