缺氧诱导因子-1α与Wnt/β-catenin信号通路在缺氧胃癌细胞中的相互作用

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

目的在缺氧环境下,探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)与Wnt/β-catenin信号通路在胃癌细胞SGC-7901中的相互作用。方法将质粒β-catenin-micRNA转染SGC-7091细胞,筛选稳定转染细胞株SGC-7901-β-catenin-micRNA。将SGC-7901细胞分为对照组、脂质体组和阴性对照组,对照组:常氧培养48h;脂质体组:常氧培养24h后,加入10μl脂质体,培养24h;阴性对照组:常氧培养24h后,转染阴性对照质粒,培养24h;设稳定转染细胞株为干扰组,常氧培养48h。采用倍增时间试验、平板克隆形成试验及流式细胞术检测各组细胞倍增时间、平板克隆集落数及细胞周期的变化。另取SGC-7901细胞,分为对照组、缺氧组、双重缺氧组;对照组:常氧培养48h;缺氧组:常氧培养32h,物理缺氧培养16h;双重缺氧组:常氧培养24h,化学缺氧培养8h后,再同时物理缺氧培养16h。同时取稳定转染细胞株,分为对照干扰组、缺氧干扰组和双重缺氧干扰组。对照干扰组:常氧培养48h;缺氧干扰组:常氧培养32h,物理缺氧培养16h;双重缺氧干扰组:常氧培养24h,化学缺氧培养8h后,再同时物理缺氧培养16h。采用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中HIF-1α、β-catenin的mRNA及蛋白的表达水平。结果与对照组、脂质体组、阴性对照组比较,干扰组倍增时间延长,平板克隆集落数减少,细胞阻滞在G1期比例增加,S期减少,差异均有统计学意义(P〈0.05)。缺氧组与对照组、双重缺氧组与缺氧组、缺氧干扰组与对照干扰组及双重缺氧干扰组与缺氧干扰组相比,HIF-1α、β-catenin的mRNA及蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P均〈0.05)。缺氧干扰组与缺氧组及双重缺氧干扰组与双重缺氧组比较,β-catenin、HIF-1α的mRNA及蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P均〈0.05)。结论 HIF-1α激活可调控Wnt/β-catenin通路,但也受控于Wnt/β-catenin通路,二者之间相互影响,相互调节。