蛋白桑：桑叶总黄天冬酰胺酮提取及纯化工艺研究

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

第一章前言弟一草日u 吾桑叶异名铁扇子，为桑科属(Morus L.)的树叶。本属植物全球约有16种，分布于北温带、亚洲热带和非洲热带及美洲地区，有许多种(Species)及变种(Variety)。根据国内外植物学家的文献记载，近年来，各省区开展了桑品种资源的考察，收集到大量的实物表明，我国是世界上桑种最多的国家，约有11种，分布于全国大部分地区，以江苏、浙江等南方养蚕地区产量较大。其中栽培种有鲁桑，白桑，广东桑，山桑，瑞桑等，野生种有长穗桑，长果桑，黑桑，华桑，蒙桑，川桑，鸡桑等¨。1.I桑叶有效成分的研究进展自古以来，桑n十主要作为养蚕和禽畜的主要饲料，营养丰富。其实，桑叶也是一种很好的中药。桑叶中含有丰富的蛋白质、糖类化台物、生物碱、微量元素、维生素、黄酮及黄酮苷类、甾类、氨基酸类、挥发油(有机酸、酚类)[31等成分，具有极高的营养价值和药用价值。桑叶最早记载于《神农本草经》，桑叶性味苦甘、寒，甘所以益血，寒所以凉血:甘寒相合，故下气而益阴，又能止咳，是中医清热解毒之要药。主治风热感冒，肺热燥咳，头晕头疼，目赤晕花等症。《本草撮要》:“一之代茶，取经霜者，长服IE汗。”桑叶有长发之妙用。《千妙方》:“治头发不长，桑叶，麻叶，煮泔水淋之，七次，可长数尺。”《本草纲目》:“桑叶乃手足阳明之药，汁煎代茗，能止消渴，明目氏发。”这些记载充分说明我国古代就有对桑叶药用价值的研究。有人称桑树为延年益寿的圣树。由于桑叶有极高的药食两用价值，所以引起了现代科研人员的极大兴趣，并对它进行了详细的研究和报道。根据相关专家分析:在今后一段时期内，桑叶保健食品将具有广阔的市场。日本一些科研人员认为，桑叶有可能成为功能性食品和原料。目前日本市场上已有桑叶面及含桑叶的小脆饼，我国研制开发了桑叶保健品种和功能性饮料，如桑叶速溶茶、桑叶八宝茶、桑叶粉、桑叶晶、桑叶保健酒、桑叶口服液、桑叶珍珠粉蜜、桑叶可乐、桑叶花粉蜜、桑叶汽水、桑叶面、桑叶糕点及桑叶膨化小食品等，从而增加了桑叶保健品和饮料的新品种，这就在一定程度上解决了胃病和失眠症患者不宜饮茶的问题，也满足了不同消费层次的需要。桑叶饮料是中老年人及不宜饮茶者的一种新型饮品，在饮茶过程中会得到一定的保健效果，有利于养神保健，延年益寿。桑叶在食品方面的开发利用逐渐受到人们的重视，随着科技的进一步发展，挖掘桑叶资源的潜力己成为今后发展的趋势:桑叶可以作为食品、药品、桑叶总黄酮提取段纯化工艺研究化妆品等原料，今后发展的重点是对桑叶有效成分的分离、提取、纯化、，还有就是对治疗糖尿病、高血压、癌症与艾滋病的研究也会成为热点。现代医学的进一步研究证实了桑叶的药用与保健价值。据分析测定，桑叶中含有多酚类、黄酮类、糖类、脂肪、18种氨基酸、胆酸、有机酸、异槲皮甙，胡萝 h素、Vbl、Vb2、Vc、叶酸和钾、钙、磷、铁、锰营养元素，以及铜、锌等人体所需的微量元素。中国农业科学院蚕研所对桑叶的营养及保健作用测定分析表明:桑叶中含有水分75 22%、粗碳水化合物16.92%，这些成分有利于减肥和消除脚气、水肿、盗汗。浙江医科大学药理实验室也表明:桑叶具有稳定神经系统功能的作用，减少或消除积滞在肌肤或内脏中的脂褐质，从而延长机体的寿命。l 1.1桑叶黄酮通过对桑叶成分的分析可知，桑叶醇提物中总黄酮含量较高，约占3.3%叫，是植物叶中含黄酮较多的一种，主要包括芸香甙(Rutin)，槲皮素(quereetin)，异槲皮索(isoquercitin)，韩国学者Kim等122】从桑叶中分离到几种黄酮，分别为缚班萨一3.氧.B-D一吡喃葡萄糖苷(紫云英菅)、堪菲日乒3.氧.(6".氧一乙酰基).B-D.吡哺葡萄糖苷、槲皮素.3.氧.(6"-氧.乙酰基)一f3-D一吡喃葡萄糖苷(芦丁)、槲皮素.3一氧.B.D.毗喃葡萄糖苷、槲皮素.3一氧_a.D.吡喃葡萄糖基一B.L.鼠李吡哺糖基一B.D.吡喃葡糖苷、槲皮素.3.氧.B.D.吡喃葡萄糖苷、槲皮素.3，7.二.氧一B.D一吡喃葡萄糖苷和槲皮素。金丰秋【23J报道，每100mg干桑叶中含异槲皮苷200--500mg，槲皮苷30mg，槲皮苦素lOOmg，部分结构见图2。1.1.2桑叶多糖赵俊㈣等采用水提法提取桑叶中的多糖物质，产量为2.58949/1009桑叶。张传蕙等用制备法测定鲜桑叶的多糖含量，达到2.55%，并对其化学成分进行了定性测定。欧阳臻等提取桑叶中的多糖物质并进一步纯化得MPll、MPl2、Mpl3三个多糖组分，用气相色谱分析得知MPll由R.ha、Ara、Xyl、Man、Glu、Gal组成，其比例为21:16:3:3:1:20:MPl2由Rha和Glu组成，其比例为3:l;MPl3主要由Rha组成。张琳华口61等比较稀酸、稀碱、蒸馏水3种提取方法，采用L9(34)正交试验，优选出最佳提取条件。并进一步进行了纯化。Asano等已从桑叶中分离出6种N一糖化合物，并确定其结构。