优宁维发布｜转染那些事情

作者：张馨予

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　　转染(transfection)是真核细胞在一定条件下主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。从本质上讲，和转化没有根本的区别。无论是转染还是转化，其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞，以提高细胞膜的通透性，从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上，人们往往也通称转染为广义的转化。

　　

　　细胞转染方法类型及不同之处如下面两张图片所示，大家可以依据自己的实验需求来选择不同的实验方法。

　　

　　一般影响转染效率的主要因素：细胞、血清、抗生素、核酸质量与数量、转染技术。

　　01--细胞

　　

　　02--核酸质量和数量

　　

　　03--血清

　　

　　推荐血清

　　

　　04--抗生素

　　

　　05--转染试剂

　　

　　推荐转染试剂

　　

　　

　　06--转染技术

　　

　　推荐仪器—— Lonza核转染系统

　　

　　NucleofectionTM 专利转染技术是基于利用电子脉冲在细胞膜上瞬间生成小孔的原理。配合使用优化好的转染程序与转染试剂不仅可将外源核酸物质导入细胞质，甚至还可让外源核酸直接通过核膜进入细胞核。

　　（1）4D-Nucleofector X Unit——最具兼容性模块

　　操作简单灵活

　　

　　不同的转染体系（ 20μl与100μl）使用相同的操作手册

　　

　　100μl 体系可转染细胞数量可达 2x107

　　

　　20μl 体系可转染细胞数量最少可至 2x104

　　

　　通量多元化

　　

　　样本处理量116个

　　

　　可平行进行12个1000μl样品

　　

　　可为1000μl 和 200μl 样品预设50个以上的参数

　　

　　可根据需求选择 200μl 体系，降低成本

　　

　　转染原代细胞

　　

　　5 种试剂盒可覆盖所有原代细胞类型

　　

　　转染优化实验更加简单便捷（存在于数据库中的细胞,无需进行条件优化)

　　

　　保护细胞功能

　　

　　4D系统采用导电聚合物电极，不会产生金属离子泄露,保护细胞不受损伤

　　

　　（2）4D-Nucleofector Y Unit, FL1——贴壁转染模块

　　

　　可在细胞生长的任何时期进行转染

　　

　　细胞活力好，转染效率可达70%

　　

　　与Clonetics原代动物神经元兼容

　　

　　简化的AD1和AD2试剂盒适用于所有细胞

　　

　　也适用于内皮细胞、成纤维细胞、心肌细胞、巨噬细胞、血管组织等其他类型细胞

　　

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