人乳头瘤病毒感染与宫颈上皮内瘤变及宫颈癌

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

1人乳头瘤病毒感染与宫颈癌因果关系的揭示

2008年诺贝尔生理学或医学奖与两个病毒有关：人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）和人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV），分别导致宫颈癌和艾滋病。德国科学家哈拉尔德·楚尔·豪森（Harald zur Hausen）凭借有关HPV的研究独享一半的奖金，另两位科学家分享另外一半。豪森的主要贡献是发现了HPV是宫颈癌的致病病毒，这一结论性的事实众所周知，但背后的传奇，我们或许并不清楚。

1936年，豪森出生在后来饱受战火蹂躏的德国城市埃森，当豪森还是医学生的时候，就对感染性疾病发生了兴趣。他说或许是因为是癌症治疗太困难，他对癌症的病因更感兴趣。豪森曾试图用牛痘病毒去破坏小鼠细胞的染色体，但收获不大。当时这一领域很偏，可以借鉴的经验不多。豪森觉得知识不够，自修了细胞遗传学和分子生物学。然而失败越来越多，豪森非常沮丧，想换个地方工作。

大西洋彼岸的一封来信帮助豪森实现了愿望。美国宾夕法尼亚大学医学院给豪森所在的研究所来信，希望能推荐一位年轻的德国学者前去工作。对于所长而言，这类信件实在太多，他随手将信丢进了废纸篓，但对研究组的年轻人们提起了这事儿。于是戏剧性的一幕发生了——豪森毫不犹豫，从废纸篓捡回了信，随后去了美国。

在宾夕法尼亚大学，豪森遇到了著名的病毒学家亨里夫妇（Werner Henle和Gertrude Henle），学习到了一种使用EB（Epstein-Bar）病毒改变伯基特（Burkitt）淋巴瘤细胞染色体的技术，让豪森备受鼓舞。3年之后豪森回到德国，在自己的实验室里，经过艰苦地努力，他发现了“无病毒产生”的淋巴瘤细胞中含有EB病毒的DNA，从而第1次显示病毒能够以基因组的形式存在于人类肿瘤细胞，通过修饰基因组使细胞呈肿瘤性生长。在淋巴细胞中发现病毒的信号完全是在意料之中，因为EB病毒可以引起单核细胞增多症。让人颇为意外的是，豪森和他的同事们在一种上皮性癌——鼻咽癌细胞中也发现了病毒。这让豪森萌发了一个大胆的假设：同为上皮细胞癌的子宫颈癌，或许并不是由当时公认的单纯疱疹病毒引起的。

1974年，豪森前往美国弗罗里达参加国际会议，报告他发现宫颈癌中不存在单纯疱疹病毒的结果。他之前的发言者是一位来自芝加哥的研究人员，报告他从宫颈癌患者的标本中分离到了40%的单纯疱疹基因组。豪森发言结束后，听众们报以“石头般的静默”，认为豪森的阴性结果是由于检验方法的敏感性不够所致。豪森说这是他人生中最低谷的一段时期，但他还是将这篇文章投了出去，《癌症研究》发表了这篇数百字的短文。

其实早在1972年，豪森就开始将HPV当作宫颈癌诱因的候选病毒进行分离，屡败屡试，3年后豪森终于从生殖器疣中分离出了首个HPV，但发现与宫颈癌无关，接下来分离出来的几种HPV也是如此，直到分离出HPV 16，才看到了成功的曙光——近一半的宫颈癌患者细胞中都含有该种类型病毒的DNA。此后，他们又找到了另一种导致宫颈癌的病毒HPV18。

1977年，豪森发表了《人乳头瘤病毒及其在鳞状细胞癌中可能的作用》一文。1983年，豪森报道大部分（超过半数以上的）宫颈癌和生殖器癌细胞中都存在HPV 16病毒。随后在1984年，他们又发现在超过25%的宫颈癌细胞中都存在HPV 18病毒。

但一系列的报道反驳了HPV的致癌性，这些报道称在几乎所有的标本中都可检测到HPV，因此，不能说明HPV是宫颈癌的致病病毒，后来证实这是由于检测方法PCR过于灵敏，标本受到交叉污染所致。1991年，大量的流行病学研究终于证实了豪森的理论，即高危型人乳头瘤病毒是宫颈癌的元凶。

追寻HPV与宫颈癌的相关性这一工作耗尽了豪森的一生，在这条曲折漫长的道路上，很多早期合作伙伴都已经改弦易辙，但豪森从不后悔，他认为“慢性病的研究值得花费同样漫长的时间”。豪森将他的研究历程和结果浓缩成一本274页的著作——《致病性人乳头瘤病毒》（human pathogenic

papillomavirus）。

豪森获得诺贝尔奖当之无愧，因为HPV与宫颈癌因果关系的揭示在宫颈癌的防治历史上具有划时代的意义，至少带来了两项巨变：宫颈癌筛查策略的改变和HPV疫苗的诞生。

2HPV与宫颈癌因果关系的发现引起了宫颈癌筛查策略的改变

20世纪40年代，美国医生巴巴尼古拉发明了通过宫颈涂片筛查宫颈癌的方法，该方法从1943年开始一直沿用到20世纪90年代中期，后来，取样方法和阅片方法出现了革新，计算机图像分析辅助诊断被引入到宫颈癌的筛查中，这就是液基细胞学检查（liquid cytological test，LCT）或薄层液基细胞学检查（thinprepcytological test，TCT），同时还对结果的报告方式进行了修改，从巴氏五级分类变为TBS（the bethesda system）分类系统。