出厂检验常见微生物指标检验方法(包括菌落总
出厂检验常见微生物指标检验方法(包括菌落总数、大肠菌群等)!
2022-08-22 15:59 来源: 环凯微生物
原标题:出厂检验常见微生物指标检验方法(包括菌落总数、大肠菌群等)!
出厂检验常见微生物指标检验方法在我国的32大类食品生产许可中大都有菌落总数和大肠菌群的出厂检验的规定,菌落总数和大肠菌群作为食品中安全指标,也是影响产品质量问题的常见指标,常常受到生产企业和消费者的高度关注。
今天,小编就带大家一起来详细的了解下食品中菌落总数和大肠菌群检测方法。
菌落总数:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(ml)检样中形成的微生物菌落总数。
菌落总数的测定检验标准:GB 4789.2-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定
菌落总数:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g检样中形成的微生物菌落总数。
01 样品稀释制备1:10样品匀液
称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水水的无菌均质杯内8000 rimin- 10000r/min均质1 min-2 min.或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中。用拍击式均质器拍打1min~2 min。制成1:10的样品匀液。
制备1:100样品匀液
用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL沿管壁慢慢注入盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头不要触及稀释液面) ,振摇试管或换用支无菌吸管反复吹打使其混合均匀。制成1:100的样品匀液。
制备10倍品匀液
按上一步操作程序。制务10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1mL无菌吸管或吸头。
取样并制备平板
选择2个一3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液) ,在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样品匀液于无菌平皿内,每个释释度做两个平皿。同时,分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内空白对照。
及时将15mL-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46℃士1℃恒温水浴锅中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
02 培养2.1 待琼脂凝固后,将平板翻转,36℃士1℃培养48 h+2h。
2.2 如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖薄层琼脂培养基(约4mL),凝固后翻转平板,按2.1条件进行培养。
03 菌落计数3.1 应对平皿上所有肉眼可见的菌落进行计数
3.2 平板上菌落计数可使用自动化菌落计数仪,也可用肉眼观察(必要时可用放大镜观察)记录培养基上菌落数量和相应的稀释倍数。
3.3 选取菌落数在30-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。
3.4 如果在一个稀释度的两个平板中,一个平板的菌落数在30-300之间,另一个大于300或小于30时,则以30-30之间平板菌落数作为本稀释度结果记录。
3.5 如所有平板的菌落数均在30CFU以下,则记录平板中具体的菌落数;如果没有菌落生长,则记录为小于1CFU。
3.6 如平板上菌落数大于300CFU,则记录为多不可计;但如果所有稀释度的平板上落数均大于300CFU,则对稀释度最高的平板进行计数、其他稀释度平板记录为多不可计。
3.7 同一稀释度的两个平行平板中,一个平板有较大片状落生长时、应不进行计数,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数。
3.8 如果同一稀释度的两个平行平板均有片状菌落生长,选取片状菌落不到平板一半,而剩余一半落分布均匀的平板,计数一半平板落数并乘以2代表全皿菌落数。
3.9 当平板上出现菌落同无明显界线的状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。
04 结果计数4.1 若只有一个稀释度平板上的菌落数在30-300CFU之间,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每g(mL)样品中菌落总数结果。
4.2 若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4.3 若所有稀释度的平板菌落数均大于300CFU,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4.4 若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算。
4.5 若所有稀释度的平板菌落数均不在30-30CFU之间,其中一部分小于30CFU或大于300CFU时,则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4.6 若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,除30-300FU范围之外的平板,按如下公式计算:
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