金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影

作者：杨超月

金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响——飞凡检测

2022-02-25 09:14 来源: 飞凡检测666

原标题：金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响——飞凡检测

抗体类药物具有靶点明确、副作用小等优点，已被广泛应用于癌症、自身免疫性疾病、器官移植后排异以及各类炎症的治疗。运用动物细胞大规模培养技术高效生产抗体类药物已成为了当今生物医药产业的核心技术。其中CHO细胞具有高效的蛋白质翻译后修饰功能以及较低的宿主蛋白分泌，已被广泛应用于复杂蛋白质，尤其是抗体类药物的生产。作为一类糖蛋白，抗体类药物在动物细胞表达过程中会发生一系列的翻译后修饰，如糖基化、C末端赖氨酸的切除、N末端谷氨酰胺的环化等，同时存在许多物理和化学降解，如天冬酰胺的去酰胺化、天冬氨酸的异构化、二硫键的还原等，从而导致单克隆抗体异质性的产生。这些抗体的异质性往往体现在糖型的差异、电荷的差异、分子量的差异以及疏水性的差异。

抗体的电荷异质性是由于翻译后修饰和降解导致抗体所带的净电荷或电荷空间分布发生了改变。这类变体可以通过离子交换色谱、疏水作用色谱和毛细管等电聚焦等方法进行分离和鉴定。在阳离子交换色谱中，抗体的酸性变体和碱性变体分别指洗脱时间小于和大于主峰的那部分电荷变体。其中酸性变体主要由天冬酰胺去酰胺化、赖氨酸的糖化、二硫键的错误连接、糖基化(唾液酸)等引起，而碱性变体则主要由赖氨酸变体、焦谷氨酸的形成、天冬氨酸的异构化、甲硫氨酸的氧化等引起。赖氨酸变体是由于抗体C末端赖氨酸的不完全酶切而引起的，它的存在会抑制补体的激活，进而影响抗体补体依赖的细胞毒作用( Complement dependent eytotoxicity, CDC)活性,是一类重要的碱性变体此外，抗体电荷变体的存在还会引起抗体稳定性、生物学活性、药物动力学、免疫原性等抗体结构和功能的改变，是抗体类药物的关键质量属性(Critical quality atribution, CQA)之一。因此，在单克隆抗体生产过程中，需要对其电荷变体含量进行严格的监测和控制。

金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响

金属离子是动物细胞无血清培养过程中一类重要的添加剂。研究表明，培养基中金属离子的浓度对CHO细胞的生长、代谢以及抗体的表达都具有一定的影响。近年来，越来越多的研究开始关注金属离子对抗体质量方面的影响，如聚体、碎片、糖基化、脯氨酸酰胺化等。然而，细胞培养过程是一个复杂的非均相反应体系，其中涉及细胞的生理状态。底物的供给和相互交织的调控网络。因此，在保证抗体产量的前提下如何有效控制抗体的电荷异质性仍是抗体类药物生产过程中遇到的关键问题之一。为此，本研究以表达单克隆抗体的CHO细胞为研究对象，考察铜离子和锌离子在细胞生长、抗体表达以及抗体电荷分布中发挥的作用，旨在为动物细胞培养基中金属离子的浓度提供合理的操作空间，从而为抗体类药物生产过程中电荷异质性的有效控制奠定基础。返回搜狐，查看更多