细胞重组技术及克隆.pdf

作者：张馨予

细胞重组技术及克隆.pdf

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文档编号：34058

上传时间：2020-04-18

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1、细胞重组及动物克隆技术细胞重组及动物克隆技术 14 1 细胞重组技术14 1 细胞重组技术 14 2 细胞核移植和动物克隆技术 14 2 细胞核移植和动物克隆技术 14 3 动物克隆技术的意义与展望 14 3 动物克隆技术的意义与展望动物细胞重组及物克隆技术细胞重组 cell reconstruction 是指从活细胞中将细胞器及其组分分离出来再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组合使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术细胞重组的概念 1 胞质体与完整细胞重组形成胞质杂种 2 微细胞与完整细胞重组成微细胞异核体 3 胞质体与核体重新组合形成重组

2、细胞 14 1 1 细胞重组的方式 1 胞质体除去细胞核后由膜包裹的无核细胞胞质体除去细胞核后由膜包裹的无核细胞 2 核体核体与细胞质分离的细胞核与细胞质分离的细胞核 3 微细胞又称微核体由一条或几条染色体微细胞又称微核体由一条或几条染色体少量细胞质和完整质膜包少量细胞质和完整质膜包裹而成裹而成 4 胞质杂种细胞将胞质体与另一完整细胞融合得到的细胞胞质杂种细胞将胞质体与另一完整细胞融合得到的细胞 5 杂种细胞核体与完整细胞融合杂种细胞核体与完整细胞融合 14 1 2 细胞重组的原料利用细胞融合技术得到的重组细胞微细胞的制作过程 A 细胞核

3、移植技术所谓核移植技术就是利用显微操作技术将一个细胞的细胞核移植到另一个细胞中或者将两个细胞的细胞核或细胞质进行交换从而可能创造无性杂交生物新品种的一项技术 14 2 细胞核移植和动物克隆技术 B 动物克隆技术是指一个细胞或个体以无性繁殖方式产生遗传物质完全相同的一群细胞或一群个体在动物繁殖学中它是指不通过精子和卵子的受精过程而产生遗传物质完全相同新个体的一门胚胎生物技术近年来我国核移植技术的发展 A 分子水平上的分子水平上的基因克隆基因克隆重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因扩增再用某探针选取钓取目的基因重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因

4、扩增再用某探针选取钓取目的基因 B 细胞水平上的细胞水平上的细胞系的培养制备单克隆抗体细胞系的培养制备单克隆抗体单克隆抗体利用动物细胞融合技术将骨髓瘤细胞和单克隆抗体利用动物细胞融合技术将骨髓瘤细胞和能产生抗体的能产生抗体的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞再去培养筛选到杂交瘤细胞系淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞再去培养筛选到杂交瘤细胞系 C 在个体水平上在个体水平上繁殖出生物个体繁殖出生物个体不通过两性细胞的结合从一个单一的细胞繁殖出生物个体即细胞不通过两性细胞的结合从一个单一的细胞繁殖出生物个体即细胞个体个体克隆的层次基因水平的克隆细胞

5、水平上的克隆单克隆抗体制备植物组织培养过程无菌切下根尖无菌切下根尖无菌培养无菌培养形成愈伤组织形成愈伤组织组织分化形成器官组织分化形成器官发育成新个体发育成新个体无菌培养植物细胞的全能性 14 2 1核移植技术的一般操作程序和供体细胞的准备和供体细胞的准备在核移植操作中细胞核供体细胞首先必须是完整的二倍体该细胞必须保持有供体动物完整的基因组在核移植操作中细胞核供体细胞首先必须是完整的二倍体该细胞必须保持有供体动物完整的基因组其次供体细胞核必须能够在受体其次供体细胞核必须能够在受体细胞质的作用下产生细胞分化过程的倒转变得如同刚刚受精的合

6、子一样能重新完成从受精到发育成一个正常动物个体的全过程细胞质的作用下产生细胞分化过程的倒转变得如同刚刚受精的合子一样能重新完成从受精到发育成一个正常动物个体的全过程供体细胞主要有两大类胚胎卵裂球和体细胞另外核供体细胞的来源还有胚胎干细胞和胎儿成纤维细胞供体细胞主要有两大类胚胎卵裂球和体细胞另外核供体细胞的来源还有胚胎干细胞和胎儿成纤维细胞细胞核移植细胞核移植常用的核移植方法有两种即胞质内注射和透明带下注射胞质内注射是用一个外径常用的核移植方法有两种即胞质内注射和透明带下注射胞质内注射是用一个外径5 8 m 的注核针吸取供体核