供体来源游离DNA，一种新的液体活检技术

作者：杨超月

提到移植肾穿刺活检，移友们可能有一些顾虑，担心穿刺影响肾脏，但目前移植肾穿刺活检还是诊断的金标准。近年来兴起的无创的供体来源游离DNA检测技术，可以帮助区分排斥与感染，可以很大程度代替传统的穿刺活检，免除移友们的担心，今天就这项技术给大家讲一下。

供体来源游离DNA，简称dd-cfDNA，是指在受者的血液和尿液中存在的来自供者的游离DNA片段，这些片段带有供体的信息，可以用来评估供肾的健康状况和损伤部位。

dd-cfDNA技术的优势

dd-cfDNA技术通过二代基因测序平台检测血液和尿液中的供体来源的游离DNA的含量，可以预测移植物的损伤状况，作为排斥反应的诊断指标，具有无创、高灵敏度和实时监测的优点，故也成为液态活检。国际上多个移植中心的研究发现，dd-cfDNA技术能够检测移植物排斥反应，可以代替传统的穿刺活检，在国外甚至已成为一种常规的检测手段。

dd-cfDNA技术与肾移植

移植肾出现排斥反应后，血液和尿液中的dd-cfDNA含量会增加，根据含量的不同，可以评估排斥反应的严重程度。根据排斥反应类型的不同，血液和尿液中的游离DNA含量也有所不同，这样就可以提示排斥反应的不同部位。这项技术非常灵敏，研究发现早在排斥反应出现2个月前，游离DNA的浓度已开始上升，可以早期诊断排斥反应。

这项技术的效果怎么样呢？研究发现，检测血液dd-cfDNA可以检测出高达88.9%的急性体液排斥反应。我们知道，受者体内如果检测到针对供肾的抗体（DSA），发生排斥反应的危险很高，但并不是所有存在DSA的都会发生排斥。通过检测血液dd-cfDNA就可以明确是否已发生了排斥反应，如果检测阴性，很大可能没有发生排斥反应，从而避免盲目的抗排斥治疗及不良反应。

dd-cfDNA与BK肾病

肾移植术后检测到BK病毒很常见，绝大多数并没有发展到BK病毒肾病，如果盲目减药或换药就可能导致排斥反应。BK病毒平时潜伏在肾小管和膀胱上皮细胞中，移植术后BK病毒激活后可以感染肾组织导致肾功能下降，依靠PCR检测BK病毒含量很难区分是否发生BK肾病。dd-cfDNA技术通过检测血液和尿液中的供者游离DNA，可以区分是否发生BK肾病，为后续治疗明确方向。

目前dd-cfDNA检测费用还是偏高，如果能早期明确排斥和感染，延长移植肾寿命，其带来的益处还是非常值得的。这项新技术可以很大程度代替传统的穿刺活检，可以在合适时机进行合理的选择来明确排斥和BK病毒感染。

参考资料：

Park S, et al. The Role of Donor-derived Cell-free DNA to Detect Subclinical Acute Rejection in Kidney Allograft [abstract]. Am J Transplant. 2021; 21 (suppl 3)

E. M. Gielis. Cell-Free DNA: An Upcoming Biomarker in Transplantation.American Journal of Transplantation 2015; 15: 2541–2551