M13通用引物为什么有这么多种?
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忘忧草_
木虫 (正式写手)
M13通用引物为什么有这么多种?
最近发现M13通用引物为什么有这么多种啊?在生工网站上看到有:
M13/pUC Sequencing Primer(-20) d(GTA AAA CGA CGG CCA GT)
M13/pUC Sequencing Primer(-40) d(GTT TTC CCA GTC ACG AC)
M13/pUC Sequencing Primer(-47) d(CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC)
M13/pUC Reverse Sequencing Primer d(AAC AGC TAT GAC CAT G)
M13/pUC Reverse Sequencing Primer (-48) d(AGC GGA TAA CAA TTT CAC ACA GGA)
他们之间有社么区别吗?
怎么使用啊?
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不将就
2013-08-28 21:13:40
回复此楼cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
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忘忧草_: 金币+22, ★★★很有帮助 2013-08-29 09:18:34
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-29 13:23:15
引物的位置和长度稍有不同。引物长短不同影响PCR时的退火温度。位置主要是因为测序时靠近引物的序列信号差,如果你克隆插入时所用的酶切位点比较靠近多克隆位点的末端,需要用离得稍微远一些的引物才能完全测出插入片段的序列。如果你只是用于一般的PCR检测,只要选取两个退火温度匹配是上下游引物就行了。
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2013-08-28 22:24:14
回复此楼忘忧草_
木虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖: : Originally posted by cicelyzh at 2013-08-28 22:24:14
引物的位置和长度稍有不同。引物长短不同影响PCR时的退火温度。位置主要是因为测序时靠近引物的序列信号差,如果你克隆插入时所用的酶切位点比较靠近多克隆位点的末端,需要用离得稍微远一些的引物才能完全测出插入 ...
恩 谢谢您 也就是说用那种都可以了
我用的是takara的pMD™19-T Vector Cloning Kit,里面说“对克隆后对的PCR产物使用BcaBEST Sequencing primers、M13 Primers 进行DNA测序” 我不太理解这里说的是他们是一对引物还是分别是一些列的引物呢?还有就是引物序列是什么啊?
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不将就
2013-08-29 09:22:01
回复此楼cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
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