核酸外切酶 V (RecBCD)

作者：张馨予

特性:
去除线性单链和双链 DNA，但对切刻和超螺旋质粒 DNA 无作用
概述:
核酸外切酶 V 是从 E. coli 提取的 RecBCD 复合蛋白，具有几种不同的活性，包括 ATP 依赖型单链 DNA 内切酶活性、单链和双链 DNA 外切酶活性。反应具有双向（3′ 和 5′ 端）持续性，产物为寡脱氧核苷酸（1, 2, 3）。所有核酸外切酶 V 的酶活都需要二价阳离子参与，外切酶活性需要 Mg2+，Ca2+ 会抑制外切酶活性，并有解旋酶活性，将双链 DNA 打开，但不水解（4, 5）。
来源:
纯化自 E. coli 菌株，该菌株含有表达核酸外切酶 V（含 RecB，RecC，RecD 三个亚基）的质粒。
反应条件:
1X BalbBuffer 4
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 1 mM DTT (pH 7.9)]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 30 分钟。
质保声明:
核酸外切酶 V 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
浓度:
10,000 units/ml。
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