细胞增殖实验（CCK8法）

作者：杨超月

细胞增殖实验（CCK8法）

一、技术简介

细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老和死亡的细胞；同时，多细胞生物可以由一个受精卵，经过细胞的分裂和分化，最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出，通过细胞分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去。可见，细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。真核细胞的分裂方式有三种，即有丝分裂、无丝分裂和减数分裂。

CCK-8试剂盒是Cell Counting Kit-8的简称。其原理是用WST-8四唑盐（2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)- 3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium）能被活细胞内的脱氢酶还原成橙色甲臜染料，然后测定450 nm下的吸光值，生成的甲臜的量与活细胞数量成正比。

二、实验流程

1. 收集对数期细胞，调整浓度。

2. 将细胞种植于96孔板中，待细胞贴壁后加药。

3. 5% CO2，37 oC孵育一定时间。

4. 每孔中加入10 μL CCK-8溶液，培养1-4 h。

5. 取出96孔板，将其置于酶联免疫检测仪上，震荡15 s，然后在450 nm下测量吸光。

6. 结果统计分析。

三、服务说明及结果

1. 客户提供：培养好的细胞和作用药物。

2. 公司提供：原始数据及分析结果、完整的实验报告。

3. 实验周期：10个工作日，具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。