包装细胞系、逆转录病毒载体及表达系统、逆转



逆转录(也成为反转录病毒,Retrovirus)病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒载体在构建时,删去了pol、env基因和gag基因的3′端,但保留了病毒颗粒所需的ψ+序列。其目的是在于提高载体的安全性,防止反转录病毒进入宿主细胞后进行增殖并包装成病毒颗粒对宿主细胞造成可能的伤害。这样,在制备反转录病毒载体时,就必须有一个辅助细胞系,这种细胞内有缺陷型病毒可以提供包装用的外壳蛋白,但自身没有包装信号。这样,反转录病毒载体就可利用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随机整合到宿主细胞基因组内,这种载体还在不断改进之中。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务,产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统,针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒,逆转录病毒的快速定量,以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等,几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节:

逆转录病毒包装细胞系(Platinum Retroviral Packaging Cell Line)

Cell Biolabs提供三种铂金版逆转录病毒包装细胞系:单嗜性(Ecotropic)Plat-E包装细胞系、双嗜性(Amphotropic)Plat-A包装细胞系及泛嗜性(Pantropic)Plat-GP包装细胞系。它们对不同的细胞具有不同的侵染性。一般来说,Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞;Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞(但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G,该外壳蛋白宿主范围非常广);Plat-A用的比较少,但是其宿主范围比Plat-E要多一些,比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等…点击阅读更详细产品信息“逆转录病毒包装细胞系—铂金版Plat-E/Plat-A/Plat-GP系列”。

Product Name

 

Size

 

Catalog Number

 

Platinum-E Retroviral Packaging Cell Line, Ecotropic

 

>3 x 106 cells

 

RV-101

 

Platinum-A Retroviral Packaging Cell Line, Amphotropic

 

>3 x 106 cells

 

RV-102

 

Platinum-GP Retroviral Packaging Cell Line, Pantropic

 

>3 x 106 cells

 

RV-103

 

pVSV-G Packaging Vector

 

10 μg

 

RV-110

 

铂金版逆转录病毒表达系统(Platinum Retroviral Expression Systems)

结合具有专利技术的Plat-E及其它逆转录包装细胞系,并采用新颖的pMXs-Puro系列表达载体,共同构建高效的铂金版逆转录病毒表达系统。Cell Biolabs的铂金版逆转录病毒表达系统能有效的提高病毒的滴度(平均达到107感染滴度/ml),只需单质粒转导即可完成基因表达工作。根据包装细胞系又分为单嗜性、双嗜性和多嗜性系统,每种细胞系均能表达gag和pol基因,其中单嗜性Plat-E包装细胞系和双嗜性Plat-A包装细胞系还能表达包膜蛋白。用户只需要将感兴趣的基因克隆进穿梭载体pMXs-Puro中,转导进包装细胞内即可。如果选择多嗜性Plat-G系统,还需要VSV-G质粒提供辅助包装。

Product Name

 

Size

 

Catalog Number

 
Platinum-E Retroviral Expression System, Ecotropic  

1 kit

 

VPK-300

 

Platinum-A Retroviral Expression System, Amphotropic

 

1 kit

 

VPK-301

 

Platinum-GP Retroviral Expression System, Pantropic

 

1 kit

 


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