定量聚合酶链式反应,quantitative polymerase chain rea

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

补充资料：聚合酶链式反应

分子式：
CAS号：

性质：又称基因体外扩增技术或核酸体外扩增技术。利用两种与相反链杂交并利用附着于目标DNA两端的寡核苷酸引物在高温(95℃)使含目标DNA片段的DNA双链变性，分解为单链。在较低温度(37～63℃)与引物退火：然后变温到72℃左右，在耐高温DNA聚合物酶作用下引物被沿样板DNA单链延伸合成互补链，然后又变性→退火→延伸反复进行。引物大大过量，dNTP过量，酶在高温中是较稳定的，这样经过几十个循环，目标DNA片段就按2n数递增。用此法可从mRNA中，cDNA库中扩增出目标基因。过去一般合成500～1000bp较好，现已发展出大片段(75kb)的PCR，且差错甚少。PCR技术的发展还可用于定点突变，质粒重组及FLP等方面。这一技术的作用范围日益扩大，已成为分子生物学工作者基本技术之一。这项专利技术1985年由美国塞特斯(Cetus)公司开发。是20世纪80年代分子生物学领域中的一项革命性突破，已在分子生物学、医学、法学等领域发挥了极大的作用。

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