酶切、回收、连接常识（1）

作者：杨超月

1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ）

A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶

E. RNAase

2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B )

是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。
它们的识别序列完全相同。
它们的切割方式可以相同，也可以不同。
有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。
两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。

3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是（ A ）

A. 37℃ B.30℃ C.25℃ D.16℃ E.33℃

4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B )

A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。

B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。

C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。

D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。

E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。

5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D )

A. 1/44 B. 1/66 C. 1/64 D.1/46 E. 1/106

6. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C )

A. PH:2-4 B. PH:4-6 C. PH:6-8 D. PH:8-10 E. PH:4-10

7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D )

A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。

B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。

C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。

D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。

E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。

8. II类限制酶反应中必须的阳离子是（ C ）

A. Na + B. Ca2+ C. Mg2+ D. Zn2+ E. Mn2+

9. RFLP形成的原因是（ A ）

A. 由于遗传变异造成同源染色体中碱基的随机变化。

B. 使用不同的限制性内切酶进行切割。

C. 杂交时使用不同的探针。

D. 每种染色体存在两条。

E. 提取不同的染色体DNA酶切。

10. 下列关于限制酶命名的表示方法，正确的是（ E ）

A. Sau.3A I B. B.amH I C. pst I D. Ecor I E. Hind III

11. 需进行DNA部分酶切时，控制下列哪种条件最合适（ D ）

A. 反应时间 B. 反应体积 C. PH D. 限制酶量 E.反应温度

12. 下列酶在反应中不需要ATP的是( D )

A. E coK B. T4DNA连接酶 C. BamH I D. EcoB E. DNA pol I

13. 限制性内切酶可特异性识别 ( B )

A. 双链DNA的特定碱基对 B. 双链DNA的特定碱基序列

C. 单链RNA的特定碱基序列 D. 单链DNA的特定碱基序列

E 双链RNA的特定碱基对

14. 下列与RFLP相关的一条是( D )

A. 不同限制酶在单个染色体DNA上的限制性图谱。

B. 两种物种个体间的限制性图谱。

C. 同一个体等位基因的限制性图谱。

D. 同一物种不同个体的限制性图谱。

E. 非同源染色体用同种限制酶切形成的限制酶图谱。

15．限制酶的星号活性是指在非正常条件下，限制酶（ A ）

A. 识别和切割序列发生变化。

B. 切割活性大大提高。

C. 识别和切割序列与原来完全不同。

D. 可以任意切割DNA。

E. 只能部分切割DNA。