GelRed and GleGreen 核酸凝胶染料

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

GelRed 和 Gelgreen 超级核酸染料

真正安全的EB替代染料

声明：GelRed和GelGreen核酸染料是美国Biotium公司专利产品，因为无毒和良好的特性，GelRed产品已经被市场广泛接受。遗憾中国市场假货众多，声称具有与GelRed和GelGreen相同特性的国产核酸染料多数假冒伪劣产品，个别不良商家甚至加入一定量EB欺骗消费者。任何擅自生产、销售与GelRed、GelGreen相同特性产品的公司均属于侵犯专利的违法行为，必将受到严惩。购买时请认准Biotium公司中国区授权经销商

Gelred 明显优于 BtBr
EtBr GelRed

GelRed and GleGreen 核酸凝胶染料

图1.采用预制凝胶法（前染法），比较GelRed 和溴化乙锭（EB）在1％琼脂糖（TBE缓冲溶液）中的染色效果。使用Invitrogen生产的1kb Plus DNA Ladder样品两倍梯度稀释上样，各泳道上样量从左到右依次为200ng，100ng，50ng和25ng。使用300nm 光源激发的透射仪和EB滤光片成像。
GelGreen 染色效果无与伦比
SYBR Safe GelGreen

GelRed and GleGreen 核酸凝胶染料

图2.采用电泳后染色（后染法），比较GelGreen and SYBR Safe 在 1％琼脂糖凝胶（TBE缓冲溶液）中染色效果。使用Invitrogen 生产的1kb Plus DNA Ladder样品两倍梯度稀释上样，各泳道上样量从左到右依次为200ng，100ng，50ng和25ng。使用254nm激发的透射仪和SYBR滤光片成像。

由美国Biotium公司研发的GelRed和GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的极佳的荧光核酸染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。(）

目前大多数商业化的核酸染料（凝胶染色试剂）总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不完全令人满意。例如，虽然 EB(溴化乙啶）作为目前使用最广泛的核酸凝胶染色试剂，能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度，但它是一种高诱变性的化学物质，对人体潜在危害非常大。而且EB染色后会产生较高的背景荧光信号（如图1）。SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被厂家宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解，稳定性差导致染色效果极不可靠。 SYBR safe 被认为是较为安全的核酸染料，但它的染色效果还远不及 SYBR Green I 。

特性:

高灵敏度
GelRed 和 GelGreen 是目前市场中最灵敏的凝胶核酸染料
稳定性极好
可以使用微波炉加热，染料和预制凝胶可以在室温下长期保存
更安全
艾姆斯氏试验结果表明，该染料的诱变性远小于溴化乙锭（ EB ）和SYBR 系列染料
广泛的适应性
适用于预制凝胶法和凝胶电泳后染色法
染色过程简单
与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解；而电泳后染色过程也只需 30 分钟且无需脱色或冲洗
对 DNA 和 RNA 的迁移影响极小
对核酸迁移的影响小于 SYBR Green I
与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容
GelRed 可以完美的替代 EB，无需任何操作上的改变； GelGreen 足以替代任意一种 SYBR 染料，操作方法完全一样。（见图 4 中的光谱图）

常用的染色方法有预制凝胶染色（前染）和凝胶电泳后染色（后染），无论采用哪一种方法，GelRed 和 GelGreen，都能表现出极高的灵敏度。

为配合302/312 nm UV 凝胶成像系统而设计的 GelRed ，按照Biotium公司创新的试验步骤（该试验步骤中使用稀释的 NaCl 溶液替代传统的 TBE 缓冲溶液），在凝胶电泳后染色法中优于或者至少相当于 SYBR Gold 。但与 SYBR Gold 不同， GelRed 在预制凝胶法中使用时仍然有极高的灵敏度，事实上GelRed 在检测低浓度、微量 DNA 方面比 EB 表现出更高的灵敏度，尤其对小分子量的 DNA 检测非常灵敏（图1）。