【分子克隆】第七期:病毒表达载体
病毒表达载体是以病毒基因组序列为基础，插入必要的表达载体元件所构建成的真核基因转移工具。这些表达载体元件有①源于病毒的启动子和增强子；②病毒的复制子序列以及所需的反式作用因子编码基因；③poly A加尾信号。
病毒表达载体可用于∶①外源蛋白的真核表达；②基因治疗；③多价、多联活载体疫苗的研制；④基因功能的鉴定
病毒载体大体上可分为两种类型：重组型病毒载体和无病毒基因的病毒载体。
重组型病毒载体以完整的病毒基因组为改造对象，一方面选择性地删除病毒的某些必需基因，缺失的必需基因的功能由互补细胞反式提供；另一方面用外源基因表达单位替代病毒非必需基因区；而病毒复制和包装所需的顺式作用元件不变。这类载体一般通过同源重组方法将外源基因表达单位插入病毒基因组中。
无病毒基因的病毒载体这类载体系统往往由载体质粒和辅助系统组成。重组载体质粒主要由外源基因表达盒、病毒复制和包装所必需的顺式作用元件及质粒骨架组成。辅助系统包括病毒复制和包装所必需的所有反式作用元件。在辅助系统的作用下，重组载体质粒（包含或不包含质粒骨架）以特定形式（单链或双链，DNA或 RNA）被包装到病毒壳粒中，其中不含有任何病毒基因。
这类载体的优点在于载体病毒本身安全性好，容量大；缺点在于往往需要辅助病毒参与载体DNA的包装，而辅助病毒又难以同载体病毒分离开来，造成最终产品中辅助病毒污染，从而影响其应用。实际上，无病毒基因的病毒载体可以看作是重组病毒载体的一种极端减毒情况。重组AAV 载体就属于无病毒基因的病毒载体。
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