大同pcr实验室规划图文并茂

作者：张馨予

大同pcr实验室规划图文并茂

【山西天朗科技发展有限公司】如使用全自动分析仪，区域可适当合并。

扩增前区与扩增后区应严格分开，须使用不同的房间，PCR实验室区域设计两区之间有一定的间隔。

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1、严格执行各区功能划分：剂储存和准备区：贮存剂的制备、剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。标本制备区：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。扩增区：cDNA合成、DNA扩增及检测。

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标准的PCR实验室设计为四个区域：

样品处理区：样品登记、分装；核酸提取、保存和加样。

扩增产物-分析区：扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。

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干性实验室与湿性实验室干性实验室是指精密仪器室、天平室、高温室等不使用或较少使用水的实验室。湿性实验室是指进行样品处理、容量分析、离心、沉淀、过滤等常规实验而需要配备给排水的实验室。二、主实验室与辅助实验室主实验室是指进行分析、研究等核心实验的主要实验室，如精密仪器室等。辅助实验室是指为实现核心实验的辅助性实验室，如天平室、高温室、样品室等。

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核酸扩增室及产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染剂与样品，可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。

如果使用荧光PCR仪，PCR实验室平面设计考虑扩增室和产物分析室可以合并。

若房间进深允许，可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面，缓冲间比专用走廊更有意义。

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4、PCR实验剂的操作。⑴所用的所有溶液都应该没有核酸和（或）核酸酶（DNase和RNase）污染。⑵所有PCR剂中使用的水都应该是高质量的－新鲜蒸馏的去离子水，用0.22μm过滤的，并且是高压灭菌。⑶在20℃到25℃贮存的剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂，在扩增剂或样品制备剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。⑷所用剂都应该以大体积配制，实验一下看剂是否满意，然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。⑸所有剂和样品准备过程中都要使用一次性灭菌的瓶子和管子。⑹新配制的剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。⑺样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。

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在特定条件下，PCR实验室区域设计样品处理区和剂准备区可设在同一房间内在生物安全柜内操作：

a.每个实验人员、实验组分别使用各自的剂及耗材；

b.盛放污染材料的器皿密封并一次性使用；

c.用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。

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本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。4、扩增产物分析区该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测，此区域可不设。本区是主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其他区域。